Gorgonian dan scleractinian karang jaringan sampel
dekalsifikasi
Gorgonian dan karang scleractinian sampel jaringan yang
ditransfer ke solusi decalcifying (100g etilendiamin
asam tetraacetic [EDTA] (Fisher Scientific, Waltham, MA), 10g
NaOH / L disaring air laut, pH 7.4) dan ditempatkan dalam LabPulse ™
Microwave Tissue Processor (H 2850, Energi Beam Ilmu,
CT). Fragmen penggemar laut antara 10 sampai 20mm2 yang dekalsifikasi
selama 20 menit, sementara fans besar fragmen (misalnya, <20mm2) dan
A. cervicornis fragmen yang dekalsifikasi selama 40 menit (Tabel 1).
dekalsifikasi bertekad akan selesai bila tidak ada
sclerites (duri kalsium karbonat) yang diamati pada
permukaan sampel gorgonian, dan kerangka kalsium karbonat
dibubarkan dari sampel scleractinian. Awal
percobaan dilakukan dengan menggunakan tingkat daya yang berbeda dari
microwave dan reagen volume untuk menentukan optimal
pengaturan microwave untuk jaringan karang (data tidak ditampilkan). Untuk
hasil yang disajikan dalam laporan ini, jaringan yang diproses
pada suhu 40oC selama 20-40 menit pada daya kerja 80% (720 watt).
Perhatikan bahwa tingkat daya microwave untuk dekalsifikasi dan
jaringan pengolahan didirikan secara signifikan lebih tinggi (720 watt)
dari tingkat daya yang biasanya telah disarankan
(250-500 watt) [14]. Hasil keseluruhan menunjukkan bahwa pada
suhu konstan, volume rendah dan tingkat daya tinggi
(720 watt), proses dekalsifikasi dan jaringan pengolahan
dipercepat tanpa detrimentally mempengaruhi integritas
pengolahan histologi menggunakan teknologi microwave
Langkah Solusi Vol. (ml) Temp (0c) Waktu (menit)
1 Decal-solusi 300 40 20-40
2 Etanol 95% 500 40 4
3 Etanol 95% / 100%
2-Propanol
500 40 4
4 100% 2-Propanol 500 40 4
5 2-Propanol / Paraffin 500 80 10
6 Parafin vakum - 60 30
Tabel 1. Langkah, dengan volume, suhu, dan waktu yang diperlukan untuk
proses histologis menggunakan teknologi microwave.
dari jaringan. Oleh karena itu, suhu dikontrol oleh
volume reagen, dan independen dari tingkat daya
pengaturan microwave.
Sedang diterjemahkan, harap tunggu..
