0.2 M NaOH to a selected pH value.

0.2 M NaOH to a selected pH value. The experiment
was completed when at least three pH measurements
performed at an early, an intermediate and a late
time-point of the 24 h period resulted in the same pH
value. The equilibrium solubility was attained within
24 h. The pH values were also measured for the
supernatants obtained after centrifugation, in order to
certify that the drug solutions analyzed had the same
pH value as the suspensions. Measurements were
made using pH-meter (CPC-401 Elmetron) with an
associated uncertainty of 0.01. The test-tubes were
thermostated by a temperature control thermostat
(Lauda A3, Germany) through the jacket of the vessel
with uncertainty 0.1 K. Samples were withdrawn after
24 h, since a previous study had shown that a majority of drugs reach their solubility equilibrium within
this time-scale [7,23]. Furthermore, this time-scale
often is used in drug development settings. Excess
solid was equilibrated using a rotating-bottle apparatus (Hettich Zenrifugen, EBA 20) at 300000 rpm for
30 min. Following centrifugation, the supernatant was
collected and used for solubility and pH determinations. The concentration of the drug in the supernatant solution was determined by an HPLC procedure with single-wavelength UV detection. All compounds were analyzed in quadruplicates at each
investigated pH value, as it was shown in the previous works [23,25,26].
The prerequisites in the selection of the buffer
system were that the buffer should display an osmotic
pressure comparable to the osmotic pressure of the
intestinal fluid (278 mOsm/kg) and that it should have
an acceptable buffer capacity. Thus, 150 mM K2HPO4
(340 mOsm/kg) was chosen as buffer, and this buffer
was mixed with pure drug to obtain the desired pH
values. For pH below the pKa value the HCl was
added and for the values above the pKa values, the
NaOH was added [7].
HPLC Analysis
Each sample contained excess of drug and buffer solutions, sodium hydroxide or hydrochloric acid
solution. Drug concentration in each sample was
measured using an HPLC-UV-Vis apparatus delivered
by Agilent Technologies, consisting of: 1200 Series
Quat pump, 1200 vacuum degasser, 1200 DAD/
/MWD. A C18 analytical column (4.6 mm×150 mm)
with a mean particle size of 5 μm was used. One buffer was prepared for mobile phase: disodium tetraborate (0.01038 M Na2B4O7 and 0.01925 M NaCl). As a
mobile phase two solutions were used: methanol (A)
and borate buffer, pH 9 (B). Injection volumes of 5 μl
were used during the analysis. The chromatographic
conditions for all the drugs are shown in Table 2.
Data analysis
The modified HH equation may be used for the
pH-dependent solubility prediction in two forms, for
monoprotic acids:
Table 2. Condition during chromatography separation

Hasil (Bahasa Indonesia) 1:

0.2 M NaOH untuk nilai pH yang dipilih. Percobaanselesai ketika setidaknya tiga pengukuran pHdilakukan pada awal, menengah dan akhirtitik waktu periode 24 h mengakibatkan pH samanilai. Kelarutan keseimbangan dicapai dalam24 h. Nilai pH juga diukursupernatants yang diperoleh setelah sentrifugasi, dalam rangka untukmenyatakan bahwa solusi obat yang dianalisis memiliki samanilai pH sebagai suspensi. Pengukuran yangdibuat dengan pH meter (Elmetron Bpk-401)terkait ketidakpastian 0.01. Tes-tabung yangthermostated oleh suhu kontrol termostat(Lauda A3, Jerman) melalui jaket kapaldengan ketidakpastian 0.1 K. sampel ditarik setelah24 h, karena studi sebelumnya telah menunjukkan bahwa sebagian besar obat-obatan mencapai keseimbangan kelarutan mereka dalamskala waktu ini [7,23]. Selain itu, skala waktu inisering digunakan dalam pengaturan pembangunan obat. Kelebihansolid adalah equilibrated menggunakan aparat berputar-botol (Hettich Zenrifugen, EBA 20) di 300000 rpm untuk30 menit. Setelah sentrifugasi, supernatant adalahdikumpulkan dan digunakan untuk penentuan kelarutan dan pH. Konsentrasi obat dalam larutan supernatant ditentukan oleh prosedur HPLC dengan tunggal-gelombang UV deteksi. Semua senyawa yang dianalisis dalam quadruplicates masing-masingmenyelidiki nilai pH, seperti yang ditunjukkan dalam karya-karya sebelumnya [23,25,26].Prasyarat dalam pemilihan buffersistem adalah bahwa buffer harus menampilkan osmotiktekanan sebanding dengan tekanan osmotikusus cairan (278 mOsm/kg) dan yang seharusnyakapasitas buffer yang dapat diterima. Dengan demikian, 150 mM K2HPO4(340 mOsm/kg) dipilih sebagai buffer, dan buffer inidicampur dengan obat yang murni untuk mendapatkan pH yang diinginkannilai-nilai. PH di bawah nilai pKa HCl adalahditambahkan dan untuk nilai-nilai di atas nilai pKa,NaOH yang akan ditambahkan [7].Analisis HPLCSetiap sampel terdapat kelebihan solusi obat dan buffer, natrium hidroksida, atau asam kloridasolusi. Konsentrasi obat dalam setiap sampel adalahdiukur dengan menggunakan alat HPLC-UV-Vis disampaikanoleh Agilent Technologies, terdiri dari: 1200 seriPompa Fungicide, 1200 vakum degasser, ayah 1200 // MWD. Kolom C18 analitis (4.6 mm × 150 mm)dengan rata-rata ukuran partikel 5 μm digunakan. Satu penyangga sudah siap untuk tahap mobile: Dinatrium tetraborate (0.01038 M Na2B4O7 dan 0.01925 M NaCl). Sebagaisolusi mobile tahap kedua digunakan: metanol (A)dan Borat buffer, pH 9 (B). Volume injeksi 5 μldipakai selama analisis. Kromatografikondisi untuk semua obat yang ditampilkan dalam tabel 2.Analisis dataPersamaan HH diubah dapat digunakan untukPrediksi bergantung pada pH kelarutan dalam dua bentuk, untukmonoprotic asam:Tabel 2. Kondisi selama pemisahan kromatografi