Salmonella isolates belonging to se

Salmonella isolates belonging to serovars Anatum(S. Anatum)(n=10, Blockley(S.Bockley)(n=15), Infantis (S. Infantis) (n=12), Hadar (S. Hadar) (n=21) and Typhimurium (S.Typhimurium) (n=15), were studied using PFGE as previously described with slight modifications [11]. Cells were grown over night on blood agar plates at 37°C. Each culture was suspended in TE buffer (100 mM Tris-HCl, 100 mM ethylenediaminetetraacetic acid, pH 8.0). To prepare the agarose plugs, 10 μl of proteinase K (2000 mg/dL stock) was added to 190 μl of the adjusted cell suspension. Then, 200 μl of melted 1% Certified Megabase agarose (Biorad, Hamstead, UK) was added to the 200 μl cell suspension/Proteinase K mixture and mixed gently. The mixture was immediately dispensed into wells of plug molds. The bacterial cells in the agarose plugs were lysed by treatment with a lysis solution containing 0.1 mg/ml Proteinase K (GIBCO-BRL, Gaithersburg, MD), 50 mM Tris–HCl (pH 8.0), 50 mM EDTA, and 1% N-lauroylsarcosine, for 2 h at 54°C. The plugs were digested with 40 U of restriction
enzyme XbaI(Promega Corp., Madison, WI) for 4 h at 37°C. Digested fragments were resolved in a 1% SeaKem Gold agarose gel (Lonza, Rockland, Maine)
in 0.5 × Tris-Borate-EDTA (TBE) buffer using a contour clamped homogeneous electric field (CHEF) apparatus (CHEF-DR III, Bio-Rad Laboratories, Richmond, CA). Electrophoresis was performed at 6 V/cm with 2.2-63.8 s linear ramp time for 19 h. Gels were cooled at 14°C throughout the run and then stained with ethidium bromide and destained with distilled water. Banding patterns were visualized by UV and photographed (Gel Doc 2000 Imager, Biorad). Salmonella ser. Braenderup H9812 PulseNet standard was used as a molecular weight marker after digestion with XbaI[16].

Hasil (Bahasa Indonesia) 1:

Salmonella isolat milik serovars Anatum(S. Anatum) (n = 10, Blockley(S.Bockley)(n=15), Infantis (S. Infantis) (n = 12), Hadar (S. Hadar) (n = 21) dan Typhimurium (S.Typhimurium) (n = 15), dipelajari menggunakan PFGE seperti sebelumnya dijelaskan dengan sedikit modifikasi [11]. Sel-sel yang tumbuh selama malam pada pelat agar darah 37° C. Setiap budaya tergantung di TE buffer (Tris-HCl 100 mM, 100 mM ethylenediaminetetraacetic acid, pH 8.0). Untuk mempersiapkan colokan agarose, 10 μl proteinase K (2000 mg/dL stock) telah ditambahkan ke 190 μl suspensi sel disesuaikan. Kemudian, 200 μl meleleh 1% bersertifikat Megabase agarose (Biorad, Hamstead, UK) ditambahkan ke 200 μl sel suspensi/Proteinase K campuran dan dicampur dengan lembut. Campuran segera dispensasi ke sumur plug cetakan. Bakteri sel-sel di agarose busi yang segaris dengan pengobatan dengan larutan lysis yang mengandung 0,1 mg/ml Proteinase K (GIBCO-BRL, Gaithersburg, MD) 50 mM Tris-HCl (pH 8.0), 50 mM EDTA, dan 1% N-lauroylsarcosine, untuk 2 h pada 54° C. Colokan yang dicerna dengan 40 U pembatasan enzim XbaI (Promega Corp, Madison, WI) untuk 4 h di 37° C. Fragmen dicerna diselesaikan dalam 1% emas SeaKem agarose gel (Lonza, Rockland, Maine) di 0.5 × penyangga Tris-Borat-EDTA (TBE) menggunakan kontur menutup homogen medan listrik (CHEF) peralatan (CHEF-DR III, laboratorium Bio-Rad, Richmond, CA). Elektroforesis dilakukan di 6 V cm dengan 2.2-63.8 s linier jalan waktu untuk gel 19 h. didinginkan pada 14° C sepanjang lari dan kemudian diwarnai dengan ethidium bromida dan destained dengan air suling. Pola banding yang Divisualisasikan oleh UV dan difoto (Gel Doc 2000 Imager, Biorad). Salmonella ser Braenderup H9812 PulseNet standar digunakan sebagai penanda berat molekul setelah pencernaan dengan XbaI [16].

Hasil (Bahasa Indonesia) 2:

Salmonella isolat milik serovar Anatum (S. Anatum) (n = 10, Blockley (S.Bockley) (n = 15), infantis (S. infantis) (n = 12), Hadar (S. Hadar) (n = 21 ) dan Typhimurium (S.Typhimurium) (n = 15), yang dipelajari dengan menggunakan PFGE seperti dijelaskan sebelumnya dengan sedikit modifikasi [11]. Sel-sel tumbuh selama malam di piring agar darah pada suhu 37 ° C. Setiap kebudayaan ditangguhkan TE penyangga ( 100 mM Tris-HCl, 100 mM asam ethylenediaminetetraacetic, pH 8,0). untuk mempersiapkan colokan agarosa, 10 ml proteinase K (2000 mg / dL saham) ditambahkan ke 190 ml suspensi sel yang disesuaikan. Kemudian, 200 ml meleleh 1% Megabase Bersertifikat agarose (Biorad, Hamstead, UK) ditambahkan ke 200 suspensi sel ml / campuran Proteinase K dan dicampur dengan lembut. campuran segera dibagikan ke sumur cetakan plug. sel-sel bakteri di colokan agarose segaris dengan pengobatan dengan larutan lisis yang mengandung 0,1 mg / ml Proteinase K (Gibco-BRL, Gaithersburg, MD), 50 mM Tris-HCl (pH 8,0), 50 mM EDTA, dan 1% N-lauroylsarcosine, selama 2 jam pada 54 ° C. Colokan yang dicerna dengan 40 U pembatasan
enzim XbaI (Promega Corp, Madison, WI) selama 4 jam pada suhu 37 ° C. Fragmen dicerna diselesaikan dalam 1% agarosa SeaKem Emas gel (Lonza, Rockland, Maine)
di 0,5 × Tris-Borat-EDTA (TBE) penyangga menggunakan kontur dijepit homogen medan listrik (CHEF) aparat (CHEF-DR III, Bio Rad Laboratories, Richmond, CA). Elektroforesis dilakukan pada 6 V / cm dengan 2,2-63,8 s waktu jalan linear untuk 19 jam. Gel didinginkan pada 14 ° C selama run dan kemudian diwarnai dengan etidium bromida dan destained dengan air suling. Pola bandeng divisualisasikan dengan UV dan difoto (Gel Doc 2000 Imager, Biorad). Salmonella ser. Standar Braenderup H9812 PulseNet digunakan sebagai penanda berat molekul setelah pencernaan dengan XbaI [16].