Vol. 4(3), pp. 27-39, October 20140

Vol. 4(3), pp. 27-39, October 2014
001: 10.5897 f JCBG20l4.0038
Article Number: 616B24948488
ISSN2141-6516
Copyright © 2014
Author(s) retain the copyright of this article http://vvww.oCQdemicj0unols.t>rgJ/CBG




Journal of Cell Biology and Genetics








Full Length Research Paper

Role of ginger extract and N-acetylcysteine in acute renal tubular necrosis: Histological, immunohistochemical and gene expression study in rats

Mohamed M. Yousef", Naglaa F. Alhusseini2*, Hamdy A. Mohamed1, Rania Eldesoky1 and
Mohamed M. Zaki1

"Department of Histology and Cell Biology, Faculty of Medicine, Benha University, Egypt
20epartment of Medical Biochemistry and Molecular Biology Unit, Faculty of Medicine, Benha University, Egypt

Received 7 September, 2014; Accepted 20 October, 2014

Acute renal failure (ARF) is a syndrome associated with high mortality rate in humans. ARF now known as acute kidney injury (AKt) represents a significant and devastating probtem in ctinicat medicine. This work was performed on adult male albino rats to study the possible protective effects of ginger which is considered as one of the promising medicinal plants and N-acetylcystiene on acute tubular necrosis induced by glycerol. Sixty adult male Albino rats divided into S groups each were included in this study. Kidney tissue specimens were processed for histological study; hematoxylin and eosin (H & E), immunohistochemical staining for caspase3 and mRNA gene expression study by real time polymerase chain reaction (RT-PCR) through the assessment of catalase (CAT) and glutathione peroxidase (GPx1} genes. The renal CAT gene expression was found to be decreased in the glycerol group (affected group). Administration of ginger extract and N-acetylcystiene separately or combined before glycerol significantly increased the CAT and GPx1 gene expression. We conctuded that the administration of oral ginger extract and N-acetylcystiene separately and combined had prophylactic role in ARF. Also the combination of both had synergistic effect.

Key words: Ginger, N-acetylcysteine, renal failure, glutathione peroxidase, catalase gene.


INTRODUCTION

Natural products and their active principles are sources for new drug discovery and treatment of diseases have attracted attention in recent years. Medicinal use of

spices/herbs has been gradually increasing in developed countries (Ajith et aI., 2008). Ginger, (Zingiber officinale Rose.),a herbaceous perennial ofthe family Zingiberaceae

"Correspondiriq outhor. E-mail: [e-mail].
Author(s) agree that this article rernoin permanently open access under the terms of the creative commons ottribution license 4.0 intemational license28 J. Cell BioI. Genet.



is an important export-oriented spice crop with high medicinal value. Ginger is completely sterile and is propagated exclusively by vegetative means using rhizome (Nair and Thomas, 2013). Ginger has been recognized to have potent antioxidant properties being an effective farager of superoxide radicals which has been regarded as a promising pratective mechanism against stress (Talpur et aI., 2013). Ginger is reported to. be a carminative, diaphoretic, antispasmodic, peripheral circulatory stimutant, astringent, appetite stimulant, anti­ inflammatory agent in addition to being useful in treating cold, headaches, arthritis, rheumatological conditions, and muscular discomfort. Studies have shown that ginger possesses antimicrobial. antischistosomal, anti­ inflammatory, antipyretic, hypoglycemic hepataprotective, diuretic and hypocholesterolemic effects (Haniadka et al.,
2012).
N-acetylcysteine (NAG) is an N-acetylated derivative of the naturally occurring amino acid cysteine (Gass and Olive, 2008). NAC is a powerful antioxidant and a scavenger of hydroxyl radicals. Recently, NAC has also been shown to have anti-inflammatary activities in tissues (Uraz et aI., 2013). The administration of NAC, as antiaxidants, has been shown to provide partial protectian against myoglobinuric-induced acute renal failure (Meeran et al., 2012). NAC has also. been used to ameliorate inflammatory response in lipapolysaccharide­ induced acute lung injury in rats and in an acute pan­ creatitis experimental model {lua et al., 200B} ARF is a syndrome associated with high mortality in humans. ARF naw known as AKI represents a significant and devastating problem in clinical medicine (Adedapa and Oyekan, 2013).
Current therapy is limited to supportive measures and preventive strategies, none of which have been definitively shown to alter martality (Bonventre and Weinberg, 2003). Oxidative stress as the result of increased free radical generation has been implicated in the pathagenesis of many diseases including several renal diseases, such as ARF induced by glycerol, gentamicin, cisplatin and cyclosporine. Free radical generation and the resulting axidative stress have been reparted as ane mechanism leading to the development of ARF and organ injury. Therefore, interventians favoring the scavenging and/ar depuratian of reactive axygen species (ROS) by dietary and pharmacalogical antiaxidants should attenuate or prevent axidative stress, thereby protecting against subsequent renal damage. Also, it has been reparted that several antioxidants have protectiVe effects in renal damage aqainst oxidative stress (Yousefipaur et al., 2010). Glycerol is used for the induction of ARF in viva. Intramuscular administration of hypertanic glycerol is the mast common used animal model of myoglobinuric ARF, characterized by a considerable reduction in renal blood flow and GFR. It is reported that the acute volume depletian madels af glycerQI-induced ARF are more closely related to the

syndrome of ARF in human beings than the chronic dehydration model (Wang et a!., 2011). This work was performed an adult male albino. rats to. study the possible protective effects of ginger which is considered as ane of the pramising medicinal plants and N-acetylcystiene an acute tubular necrosis induced by glycerol. We clarified the mechanisms of these effects through the assessment of catalase (CAT) and glutathiane peraxidase (GPx1) genes expression


MATERIALS AND METHODS

The present study was performed on 60 adult male Albino rats, aged 8 to 10 weeks and with an average weight of 180 to 200 g obtained from the animal house, Moshtonor Faculty of Veterinary Medicine, Benha University. Strict care and cleaning measures were utilized to keep the animal in a normal healthy state; the animals were kept in animal cages under the prevailing atmospheric conditions and on normal balanced diet and tap water. Animals were divided into 5 groups, each 12 animals as follows:

Group I (Control group): Without any treatment
Group II (Affected group): Glycerol (50%, 8ml/kg, 1M) was administered to rats intramuscular distributed equally in both hind limbs in one dose (Kim et al., 2010).
Group III: Each animal was given oral daily dose of ginger extract
(400 mg/kglday) for two weeks, then single injection of glycerol intramuscular distributed equally in both hind limbs in one dose. Group IV: Each animal was given oral daily dose of N­ acetyl cysteine (10 mg/kg/day) for two weeks then single injection of glycerol intramuscular distributed equally in both hind limbs in one dose. (Meeran et al., 2012).
Group V: Each animal was given oral daily dose of ginger extract (400 mg/kg/day) (Shanmugam et al., 2011) and oral daily dose of N-acetylcysteine (10 mg/kg/day) for two weeks, then single injection of glycerol intramuscular distributed equally in both hind limbs in one dose.

After 24 h from the glycerol injection, the rats of all groups were scarified; kidney specimens and blood samples were taken. The kidney specimens were processed for histological study; H & E (Gamble, 2008), Immunohistochemical staining for caspase3 (Silverberg et aI., 2006) and gene expression study by real time polymerase chain reaction (RT-PCR) through the assessment of CAT and glutathione peroxidase (GPx1) genes expression. Blood samples were obtained from the heart for measurement of serum levels of urea (mg dt) and creatinine (mg dt) using the commercially available kits (Park et ai., 2012).


Assessment catalase (CAT) and glutathione peroxidase (GPx1)
genes expressions

Tissue handling

Kidney biopsies were taken and immediately placed in Cryo tubes and stored in RNA later solution (Qiagen, GmbH) 10 III / mg of tissue at -80 °C for further processing. Total RNA extraction was done by using total RNA Purification Kit from Jena Bios"Cience GmbH, according to the manufacturer instructions with about 30 mg tissue collected in a micro centrifuge tube and then 300 rnl of I•ysis buffer containing 2ME (2 Mercapto Ethanol) which was homogenized using. rotor Tissue Rupror (Qiageo, GmhH).
Yousef et at. 29























Fig.ure 1. Photomicrograph of a section in renal cortecomedullary region of an adult male albino rat from group I (control group) showing renal glomeruli

Hasil (Bahasa Indonesia) 1:

Vol. 4(3), ms. 27-39, Oktober 2014001: 10.5897 f JCBG20l4.0038Artikel nomor: 616B24948488ISSN2141-6516Hak cipta © 2014Penulis mempertahankan hak cipta dari artikel ini http://vvww.oCQdemicj0unols.t>rgJ/ CBG Jurnal sel biologi dan genetika Panjang penuh Research PaperPeran ekstrak jahe dan N-acetylcysteine dalam nekrosis tubulus ginjal akut: histologis, ekspresi imunohistokimia dan gen studi pada tikusMohamed M. Yousef", dari Eka F. Alhusseini2 *, darilaykayla A. Mohamed1, Rania Eldesoky1 danMohamed M. Zaki1"Departemen Histologi dan biologi sel, Fakultas Kedokteran, Universitas Benha, Mesir20epartment medis biokimia dan biologi molekuler Unit, Fakultas Kedokteran, Universitas Benha, MesirMenerima 7 September 2014; 20 Oktober diterima, 2014Gagal ginjal akut (GGA) adalah sindrom yang terkait dengan mortalitas tinggi manusia. GGA yang sekarang dikenal sebagai ginjal akut cedera (AKt) mewakili signifikan dan menghancurkan probtem dalam pengobatan ctinicat. Pekerjaan ini dilakukan pada tikus dewasa laki-laki albino untuk mempelajari kemungkinan efek pelindung jahe yang dianggap sebagai salah satu tanaman obat yang menjanjikan dan N-acetylcystiene pada nekrosis tubular akut yang disebabkan oleh gliserol. Enam puluh dewasa laki-laki Albino tikus dibagi menjadi S kelompok masing-masing termasuk dalam studi ini. Ginjal jaringan spesimen diolah untuk studi histologis; hematoxylin dan eosin imunohistokimia (H & E), pewarnaan untuk studi ekspresi gen caspase3 dan mRNA oleh real-time PCR (RT-PCR) melalui penilaian catalase (CAT) dan glutation peroksidase (gen GPx1}. Ekspresi gen CAT ginjal ditemukan berkurang dalam kelompok gliserol (terkena group). Administrasi jahe ekstrak dan N-acetylcystiene secara terpisah atau dikombinasikan sebelum gliserol secara signifikan meningkatkan ekspresi gen kucing dan GPx1. Kami conctuded bahwa administrasi lisan jahe ekstrak dan N-acetylcystiene secara terpisah dan gabungan memiliki peran profilaksis dalam ARF. Juga kombinasi keduanya memiliki efek sinergis.Kata kunci: jahe, N-acetylcysteine, gagal ginjal, glutation peroksidase, catalase gen.PENDAHULUAN Produk alami dan prinsip-prinsip aktif mereka adalah sumber untuk penemuan obat baru dan pengobatan penyakit telah menarik perhatian dalam beberapa tahun terakhir. Penggunaan obat rempah-rempah rempah-rempah telah secara bertahap meningkat di negara-negara maju (dariiron et aI., 2008). Jahe (Zingiber officinale Rose.) yang abadi herba keluarga Zingiberaceae "Correspondiriq outhor. E-mail: [e-mail] setuju bahwa rernoin artikel ini secara permanen membuka akses di bawah persyaratan creative commons ottribution lisensi 4.0 intemational license28 J. sel BioI. Genet. adalah tanaman penting berorientasi ekspor rempah-rempah dengan nilai perubatan tinggi. Jahe benar-benar steril dan disebarkan secara eksklusif oleh vegetatif berarti menggunakan rimpang (Nair dan Thomas, 2013). Jahe telah diakui memiliki sifat antioksidan yang kuat menjadi farager efektif superoksida radikal yang telah dianggap sebagai mekanisme pratective menjanjikan terhadap stres (Talpur et aI., 2013). Jahe dilaporkan. menjadi karminatif, yg mengeluarkan keringat, antispasmodic, perifer peredaran darah stimutant, zat, perangsang nafsu makan, anti inflamasi agen selain menjadi berguna dalam mengobati dingin, sakit kepala, artritis, rheumatological kondisi, dan otot ketidaknyamanan. Penelitian telah menunjukkan bahwa jahe memiliki antimikroba. antischistosomal, anti inflamasi, antipiretik dan hipoglikemik efek hepataprotective, diuretik dan hypocholesterolemic (Haniadka et al.,2012).N-acetylcysteine (NAG) adalah N acetylated turunan asam amino Sistein alami (Gass dan zaitun, 2008). NAC adalah antioksidan kuat dan scavenger radikal hydroxyl. Baru-baru ini, NAC juga telah terbukti memiliki aktivitas anti-inflammatary di dalam jaringan (Uraz et aI., 2013). Administrasi NAC, sebagai antiaxidants, telah terbukti untuk memberikan sebagian protectian terhadap myoglobinuric-induced gagal ginjal akut (Meeran et al., 2012). NAC juga memiliki. telah digunakan untuk memperbaiki respons peradangan di lipapolysaccharide diinduksi paru-paru akut cedera pada tikus dan dalam panci akut creatitis eksperimental model {lua et al., 200B} ARF adalah sindrom yang terkait dengan mortalitas tinggi pada manusia. GGA naw dikenal sebagai AKI mewakili masalah yang signifikan dan menghancurkan dalam klinis obat (Adedapa dan Oyekan, 2013).Terapi saat ini dibatasi untuk mendukung langkah-langkah dan strategi pencegahan, tidak ada yang telah terbukti definitif untuk mengubah martality (Bonventre dan Weinberg, 2003). Stres oksidatif sebagai akibat dari peningkatan radikal bebas generasi telah terlibat dalam pathagenesis berbagai penyakit, termasuk beberapa penyakit ginjal, seperti ARF disebabkan oleh gliserol, gentamisin, cisplatin dan siklosporin. Generasi radikal bebas dan stres axidative dihasilkan reparted sebagai mekanisme ane mengarah ke pengembangan cedera ARF dan organ. Oleh karena itu, interventians memihak mengais-ngais dan / ar depuratian spesies axygen reaktif (ROS) oleh antiaxidants Diet dan pharmacalogical harus mengurangi atau mencegah stres axidative, dengan demikian melindungi terhadap kerusakan ginjal berikutnya. Juga, telah reparted bahwa beberapa antioksidan memiliki efek protektif dalam kerusakan ginjal aqainst stres oksidatif (Yousefipaur et al., 2010). Gliserol digunakan untuk induksi ARF di viva. Intramuskular administrasi hypertanic glycerol adalah tiang umum digunakan model hewan myoglobinuric ARF, ditandai dengan penurunan yang cukup besar dalam aliran darah ginjal dan GFR. Hal ini melaporkan bahwa volume akut depletian madels af glycerQI-induced ARF lebih erat terkait dengan Sindrom ARF pada manusia dibandingkan dengan model dehidrasi kronis (Wang et!., 2011). Pekerjaan ini dilakukan albino laki-laki dewasa. tikus untuk. mempelajari kemungkinan efek pelindung jahe yang dianggap sebagai ane pramising tanaman obat dan N-acetylcystiene nekrosis tubular akut yang disebabkan oleh gliserol. Kami menjelaskan mekanisme efek ini melalui penilaian catalase (CAT) dan ekspresi gen glutathiane peraxidase (GPx1)BAHAN DAN METODEPenelitian ini dilakukan pada 60 dewasa laki-laki Albino tikus, berusia 8 sampai 10 minggu dan dengan berat rata-rata 180-200 g Diperoleh dari rumah hewan, Fakultas Kedokteran, Universitas Benha Moshtonor. Ketat perawatan dan pembersihan langkah-langkah yang digunakan untuk menjaga hewan dalam keadaan sehat normal; binatang yang dikurung dalam kandang hewan di bawah kondisi atmosfer yang berlaku dan diet seimbang yang normal dan air keran. Hewan dibagi dalam 5 kelompok, setiap 12 hewan sebagai berikut:Grup I (kelompok kontrol): tanpa perlakuanKelompok II (terkena group): gliserol (50%, 8ml/kg, 1M) diberikan untuk tikus intramuskular merata di kedua kaki belakangnya di satu dosis (Kim et al., 2010).Kelompok III: Masing-masing hewan diberi dosis harian lisan ekstrak jahe(400 mg/kglday) selama dua minggu, kemudian satu injeksi intramuskular gliserol merata di kedua kaki belakangnya di satu dosis. Grup IV: Masing-masing hewan diberi oral dosis harian N asetil Sistein (10 mg/kg/hari) untuk dua minggu kemudian satu injeksi intramuskular gliserol merata di kedua kaki belakangnya di satu dosis. (Meeran et al., 2012).Kelompok V: masing-masing hewan diberi dosis harian lisan ekstrak jahe (400 mg/kg/hari) (Shanmugam et al., 2011) dan oral dosis harian N-acetylcysteine (10 mg/kg/hari) selama dua minggu, kemudian satu injeksi intramuskular gliserol merata di kedua kaki belakangnya di satu dosis.Setelah 24 jam dari gliserol injeksi, tikus dari semua kelompok scarified; spesimen ginjal dan sampel darah diambil. Spesimen ginjal diolah untuk studi histologis; H & E (berjudi, 2008), imunohistokimia noda untuk caspase3 (Silverberg et aI., 2006) dan ekspresi gen studi oleh real-time PCR (RT-PCR) melalui penilaian dari ekspresi gen CAT dan glutation peroksidase (GPx1). Sampel darah yang Diperoleh dari hati untuk pengukuran kadar serum urea (mg dt) dan kreatinin (mg dt) menggunakan kit tersedia secara komersial (Park et ai., 2012).Penilaian catalase (CAT) dan glutation peroksidase (GPx1)ekspresi genPenanganan jaringanBiopsi ginjal diambil dan segera ditempatkan di Cryo tabung dan disimpan dalam RNA kemudian solusi (Qiagen, GmbH) 10 III / mg jaringan-80 ° c untuk pengolahan lebih lanjut. Total ekstraksi RNA dilakukan dengan menggunakan total RNA pemurnian Kit dari Jena Bios "Cience GmbH, sesuai petunjuk produsen dengan sekitar 30 mg jaringan dikumpulkan dalam tabung micro centrifuge dan 300 rnl I•ysis buffer yang mengandung 2ME (2 Mercapto etanol) yang adalah homogen menggunakan. rotor jaringan Rupror (Qiageo, GmhH).Yousef et di. 29Fig.Ure 1. Photomicrograph dari bagian di wilayah ginjal cortecomedullary tikus dewasa albino laki-laki dari kelompok saya (kelompok kontrol) menunjukkan glomeruli ginjal

Hasil (Bahasa Indonesia) 2:

Vol. 4 (3), pp 27-39, Oktober 2014.
001: 10,5897 f JCBG20l4.0038
Nomor Artikel: 616B24948488
ISSN2141-6516
Copyright © 2014
Author (s) mempertahankan hak cipta dari artikel ini http: //vvww.oCQdemicj0unols.t> rgJ / CBG Jurnal Biologi Sel dan Genetika Full Length Paper Penelitian Peran ekstrak jahe dan N-acetylcysteine ​​nekrosis tubular ginjal akut: histologi, imunohistokimia dan studi ekspresi gen pada tikus Mohamed M. Yousef ", Naglaa F. Alhusseini2 *, Hamdy A . Mohamed1, Rania Eldesoky1 dan Mohamed M. Zaki1 "Departemen Histologi dan Biologi Sel, Fakultas Kedokteran, Universitas Benha, Mesir 20epartment Medis Biokimia dan Biologi Molekuler Unit, Fakultas Kedokteran, Universitas Benha, Mesir Diterima 7 September, 2014; Diterima 20 Oktober 2014 Gagal ginjal akut (ARF) adalah sindrom yang berhubungan dengan angka kematian yang tinggi pada manusia. ARF sekarang dikenal sebagai cedera ginjal akut (AKT) merupakan probtem signifikan dan menghancurkan dalam pengobatan ctinicat. Pekerjaan ini dilakukan pada tikus albino jantan dewasa untuk mempelajari efek protektif mungkin jahe yang dianggap sebagai salah satu tanaman obat yang menjanjikan dan N-acetylcystiene pada nekrosis tubular akut yang disebabkan oleh gliserol. Enam puluh laki-laki dewasa tikus Albino dibagi dalam kelompok masing-masing S dilibatkan dalam penelitian ini. Spesimen jaringan ginjal diproses untuk studi histologis; hematoxylin dan eosin (H & E), pewarnaan imunohistokimia untuk caspase3 dan ekspresi gen mRNA studi oleh real time polymerase chain reaction (RT-PCR) melalui penilaian katalase (CAT) dan glutathione peroxidase (GPx1} gen. Ekspresi gen CAT ginjal ditemukan menurun pada kelompok gliserol (kelompok yang terkena dampak) Administrasi ekstrak jahe dan N-acetylcystiene secara terpisah. atau gabungan sebelum gliserol secara signifikan meningkatkan CAT dan GPx1 ekspresi gen. Kami conctuded bahwa pemberian ekstrak jahe lisan dan N-acetylcystiene secara terpisah dan gabungan memiliki peran profilaksis di ARF juga kombinasi keduanya memiliki efek sinergis.. Kata kunci:. Ginger, N-acetylcysteine, gagal ginjal, glutation peroksidase, katalase gen PENDAHULUAN produk alami dan prinsip-prinsip aktif mereka adalah sumber untuk penemuan obat baru dan pengobatan penyakit telah menarik perhatian dalam beberapa tahun terakhir. Penggunaan Obat rempah-rempah / herbal telah secara bertahap meningkat di negara-negara maju (Ajith et al., 2008). Jahe, (Zingiber officinale Rose.), Abadi herba tersebut yang famili Zingiberaceae "Correspondiriq outhor E-mail:.. [e-mail] Author (s) setuju bahwa akses artikel rernoin ini terbuka secara permanen di bawah ketentuan dari creative commons ottribution lisensi 4.0 license28 intemasional J. Sel BioI. Genet. adalah tanaman rempah-rempah yang berorientasi ekspor yang penting dengan nilai obat tinggi. Jahe benar-benar steril dan disebarkan secara eksklusif oleh vegetatif berarti menggunakan rimpang (Nair dan Thomas, 2013). Jahe telah diakui memiliki sifat antioksidan kuat menjadi farager efektif radikal superoksida yang telah dianggap sebagai mekanisme pratective menjanjikan terhadap stres (Talpur et al., 2013). Jahe dilaporkan. menjadi karminatif, yg mengeluarkan keringat, antispasmodic, perifer stimutant peredaran darah, zat, perangsang nafsu makan, agen anti inflamasi selain menjadi berguna dalam mengobati dingin, sakit kepala, arthritis, kondisi reumatologis, dan ketidaknyamanan otot. Penelitian telah menunjukkan bahwa jahe memiliki antimikroba. antischistosomal, anti inflamasi, antipiretik, hepataprotective hipoglikemik, diuretik dan efek hipokolesterolemik (Haniadka et al., 2012). N-acetylcysteine ​​(NAG) adalah turunan N-asetat dari asam amino alami sistein (Gass dan Olive, 2008). NAC merupakan antioksidan kuat dan scavenger radikal hidroksil. Baru-baru ini, NAC juga telah terbukti memiliki aktivitas anti-inflammatary dalam jaringan (Uraz et al., 2013). Pemberian NAC, sebagai antiaxidants, telah terbukti memberikan protectian parsial terhadap gagal ginjal akut myoglobinuric-diinduksi (Meeran et al., 2012). NAC juga memiliki. telah digunakan untuk memperbaiki respon inflamasi dalam lipapolysaccharide diinduksi cedera paru akut pada tikus dan dalam panci creatitis akut model eksperimen {lua et al., 200B} ARF adalah sindrom yang berhubungan dengan angka kematian yang tinggi pada manusia. Naw ARF dikenal sebagai AKI merupakan masalah yang signifikan dan menghancurkan dalam kedokteran klinis (Adedapa dan Oyekan, 2013). Terapi saat ini terbatas pada langkah-langkah dukungan dan strategi pencegahan, tidak ada yang telah definitif terbukti mengubah martality (Bonventre dan Weinberg, 2003) . Stres oksidatif akibat peningkatan generasi radikal bebas telah terlibat dalam pathagenesis banyak penyakit termasuk beberapa penyakit ginjal, seperti ARF disebabkan oleh gliserol, gentamisin, cisplatin dan siklosporin. Generasi radikal bebas dan stres axidative yang dihasilkan telah reparted sebagai mekanisme ane mengarah ke pengembangan ARF dan cedera organ. Oleh karena itu, interventians menguntungkan pemulungan dan / ar depuratian spesies Axygen reaktif (ROS) oleh antiaxidants makanan dan pharmacalogical harus menipis atau mencegah stres axidative, sehingga melindungi terhadap kerusakan ginjal berikutnya. Juga, telah reparted bahwa beberapa antioksidan memiliki efek protektif kerusakan ginjal aqainst stres oksidatif (Yousefipaur et al., 2010). Gliserol digunakan untuk induksi ARF di viva. Administrasi intramuskular gliserol hypertanic adalah model tiang umum digunakan hewan myoglobinuric ARF, ditandai dengan pengurangan yang signifikan pada aliran darah ginjal dan GFR. Hal ini melaporkan bahwa volume akut depletian madels af glycerQI-diinduksi ARF lebih erat terkait dengan sindrom ARF pada manusia dibandingkan dengan model dehidrasi kronis (Wang et a!., 2011). Pekerjaan ini dilakukan albino jantan dewasa. tikus untuk. mempelajari efek protektif mungkin jahe yang dianggap sebagai ane dari tanaman obat pramising dan N-acetylcystiene sebuah nekrosis tubular akut yang disebabkan oleh gliserol. Kami mengklarifikasi mekanisme efek tersebut melalui penilaian katalase (CAT) dan glutathiane peraxidase (GPx1) gen ekspresi BAHAN DAN METODE Penelitian ini dilakukan pada 60 orang dewasa tikus Albino jantan, usia 8 sampai 10 minggu dan dengan berat rata-rata 180 200 g yang diperoleh dari rumah hewan, Moshtonor Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Benha. Langkah-langkah perawatan dan pembersihan yang ketat yang digunakan untuk menjaga hewan dalam keadaan normal dan sehat; hewan-hewan itu disimpan di kandang hewan di bawah kondisi atmosfer yang berlaku dan diet seimbang normal dan air keran. Hewan dibagi menjadi 5 kelompok, masing-masing 12 hewan sebagai berikut: Kelompok I (kontrol group): Tanpa pengobatan Kelompok II (Terkena group): Glycerol (50%, 8ml / kg, 1M) diberikan kepada tikus otot merata di kedua kaki belakang dalam satu dosis (Kim et al, 2010.). Kelompok III: Setiap hewan diberi dosis harian oral ekstrak jahe (400 mg / kglday) selama dua minggu, kemudian injeksi tunggal gliserol intramuscular merata di kedua kaki belakang di satu dosis. Kelompok IV: Setiap hewan diberi dosis harian oral N asetil sistein (10 mg / kg / hari) selama dua minggu kemudian injeksi tunggal gliserol intramuscular merata di kedua kaki belakang dalam satu dosis. (Meeran et al, 2012.). Kelompok V: (. Shanmugam et al, 2011) Setiap hewan diberi dosis harian oral ekstrak jahe (400 mg / kg / hari) dan dosis harian oral N-acetylcysteine ​​(10 mg / kg / hari) selama dua minggu, kemudian injeksi tunggal gliserol intramuscular merata di kedua kaki belakang dalam satu dosis. Setelah 24 jam dari injeksi gliserol, tikus dari semua kelompok yang diskarifikasi; spesimen ginjal dan sampel darah diambil. Spesimen ginjal diolah untuk studi histologis; H & E (Gamble, 2008), imunohistokimia pewarnaan untuk caspase3 (Silverberg et al., 2006) dan studi ekspresi gen secara real time polymerase chain reaction (RT-PCR) melalui penilaian CAT dan glutation peroksidase ekspresi (GPx1) gen. Sampel darah diambil dari hati untuk pengukuran kadar serum urea (mg dt) dan kreatinin (mg dt) dengan menggunakan kit yang tersedia secara komersial (Taman et ai., 2012). Penilaian katalase (CAT) dan glutathione peroxidase (GPx1) gen ekspresi Tissue penanganan biopsi ginjal diambil dan segera ditempatkan dalam tabung Cryo dan disimpan dalam RNA kemudian larutan (Qiagen, GmbH) 10 III / mg jaringan pada -80 ° C untuk diproses lebih lanjut. Total ekstraksi RNA dilakukan dengan menggunakan RNA total Pemurnian Kit dari Jena Bios "Cience GmbH, sesuai dengan instruksi produsen dengan sekitar 30 mg jaringan dikumpulkan dalam tabung centrifuge mikro dan kemudian 300 RNL I • penyangga ysis mengandung 2me (2 merkapto Ethanol) yang homogen dengan menggunakan. rotor Tissue Rupror (Qiageo, GmhH). Yousef et di. 29 Fig.ure 1. Photomicrograph bagian di wilayah cortecomedullary ginjal dari tikus dewasa albino jantan dari kelompok I (kelompok kontrol) menunjukkan glomeruli ginjal