Tanah diekstraksi dengan NaOH-EDTA sehingga pemulihan 50-60% dari P. Puncak paling intens dalam larutan [sup.31] spektrum P NMR masing-masing tanah itu karena ortofosfat (5,67-5,69 ppm; melihat materi Tambahan ara S1 untuk spektrum NMR penuh). Sebagian besar [sup.31] P tersisa terdeteksi di wilayah monoester (5,4-3,0 ppm) dari [sup.31] P NMR sebagai campuran puncak tajam bersama dengan fitur spektrum yang luas. Gambar 1 menunjukkan contoh [sup.31] P NMR selama dua tanah perwakilan; spektrum yang sesuai untuk semua tanah dapat ditemukan dalam buah ara bahan Tambahan S1-2. Mayoritas puncak tajam dapat ditugaskan untuk molekul kecil tertentu berdasarkan laporan sebelumnya (Turner et al 2003a;.. Doolette et al 2009). Sinyal yang menonjol di 5.0 dan 4.6 ppm diidentifikasi sebagai [alpha] - dan [beta] -glycerophosphate, produk hidrolisis basa fosfolipid (Baer dan Kates 1950; Doolette et al 2009.).
[GAMBAR 1 dihilangkan]
Hingga empat puncak di wilayah 3,93-4,47 ppm diidentifikasi sebagai produk hidrolisis basa RNA (Noack et al 2012;. Smemik et al 2015.). Dua isomer dari inositol hexakisphosphate terdeteksi, meskipun tidak di semua tanah: puncak di 4.2, 4.3 dan 4.7 ppm ditugaskan ke myo-isomer (fitat), sedangkan puncaknya pada 3,85-3,91 ppm ditugaskan ke isomer scyllo (Turner dan Richardson 2004; Turner et al 2005;.. Doolette et al 2009). Sebuah fitur yang luas yang berpusat di 4,8 ppm dan memperluas melalui wilayah 3,5-6,0 ppm jelas jelas (Gambar. 1) dan ini sebelumnya telah ditugaskan untuk 'humat P', bahan organik berat molekul yaitu tinggi di mana P hadir dalam fungsi monoester (Doolette et al. 2011a). Sinyal kecil karena diester P dan pirofosfat terdeteksi untuk semua sampel. Ini muncul di luar rentang pergeseran kimia disajikan pada Gambar. 1, namun dapat dilihat dalam spektrum penuh disajikan dalam Bahan Tambahan (gbr. S1).
Konsentrasi berbagai jenis P yang terdeteksi oleh NMR dalam ekstrak NaOH-EDTA ditentukan dengan mengintegrasikan terhadap konsentrasi diketahui dari senyawa referensi ditambahkan (metilen asam diphosphonic; MDP); dekonvolusi digunakan untuk menentukan konsentrasi spesies di wilayah monoester ramai (lihat Bahan dan metode untuk rincian). Ortofosfat adalah spesies P paling melimpah terdeteksi dalam semua kecuali empat tanah, yang mewakili 27-78% dari P terdeteksi (rata-rata 60%, Tabel 2). Nilai untuk setiap tanah individu dapat ditemukan dalam Bahan Tambahan. Untuk sebagian besar tanah, humat P adalah bentuk P yang paling melimpah berikutnya (rata-rata 31% dari total P terdeteksi). Semua spesies lain yang terdeteksi mewakili proporsi kecil dari total sinyal; rata-rata, spesies ini mewakili persentase berikut total P di NaOH-EDTA ekstrak: 3% (lipid P); 1% (RNA P); 2% inositol hexakisphosphate (phyate rscyllo - (ty, 2% diester P;? 2% pirofosfat.
Sedang diterjemahkan, harap tunggu..
