Peroxidase method (M) Fig. 5. Corre

Peroxidase method (M)

Fig. 5. Correlation of glucose concentrations as determined by the Ti-PAR method with that determined by the peroxidase-coupled method

DISCUSSION

It was previously reported that the Ti-PAR reagent could be used to detect trace amounts of hydrogen peroxide (Matsubara et at. 1983). Thus Ti-PAR reagent was used in this experiment for the determination of free hydrogen peroxide by glucose oxidase reaction. The method was rapid, convenient and reproducible compared to using a chromogen in the presence of peroxidase.

As reported previously (Matsubara and Takamura 1980) and confirmed in the present work, the absorbance spectrum ofthe Ti-PAR-H2 0 2 complex shows a peak in the pH range between 7.6 and 12.0. The absorbance at 508 nm was proportional to the concentration of added H 20 2, ranging from 0.5 to 30 IlM (Fig. 1) with a molar absorption coefficient (E) of about 3.6 x 104 M l cm-I. Constant absorption values were obtained within a few minutes following the addition of hydrogen peroxide to the Ti-PAR reagent and remained unchanged over 24 h at room temperature. Interference which was caused by the presence of excess Ti-PAR can be minimized by incubation at 37°C for a few minutes.

The results obtained in this research show that the Ti-PAR reagent can be used to assay free hydrogen peroxide and glucose and has an advantage over other methods. It does not require the use of peroxidase in the determination. The presence of peroxidase is known to prompt the oxidation of chromogens and other reducible substances. Thus, the Ti-PAR method is not affected by the presence of reducible substances, such as ascorbic acid. The sensitivity of the Ti-PAR reagent is also quite high. These findings and those reported by Matsubara et al. (1983) strongly support the use of this reagent for the colorimetric determination of trace amounts of hydrogen peroxide in biological fluid.

The Ti-PAR reagent, thus has been successfully used to determine trace biological substances in serum using appropriate enzyme combinations to produce H 20 2 through enzymatic oxidation. Matsubara and Takamura (1980)

Hasil (Bahasa Indonesia) 1:

Metode peroksidase (M) Gambar 5. Korelasi konsentrasi glukosa yang ditentukan dengan metode Ti-PAR dengan yang ditentukan dengan metode ditambah peroksidaseDISKUSIItu sebelumnya dilaporkan bahwa Ti-PAR reagen dapat digunakan untuk mendeteksi jumlah jejak hidrogen peroksida (Matsubara et at. 1983). Dengan demikian Ti-PAR reagen digunakan dalam percobaan ini untuk penentuan gratis hidrogen peroksida oleh glukosa oksidase reaksi. Metode ini cepat, nyaman dan direproduksi dibandingkan dengan menggunakan chromogen hadapan peroksidase.Seperti dilaporkan sebelumnya (Matsubara dan Takamura 1980) dan disahkan dalam karya yang hadir, spektrum absorbansi Ti-PAR-H2 2 0 kompleks menunjukkan puncak dalam kisaran pH antara 7,6 dan 12,0. Absorbansi di 508 nm adalah sebanding dengan konsentrasi ditambahkan H 20 2, mulai dari 0,5 sampai 30 IlM (Fig. 1) dengan koefisien penyerapan molar (E) dari tentang 3.6 x 104 M l cm-saya. Konstan penyerapan nilai-nilai yang diperoleh dalam beberapa menit setelah penambahan hidrogen peroksida Ti-PAR reagen dan tetap tidak berubah selama 24 jam pada suhu kamar. Gangguan yang disebabkan oleh adanya kelebihan Ti-PAR dapat diminimalkan dengan inkubasi pada 37° C selama beberapa menit.Hasil yang diperoleh dalam penelitian ini menunjukkan bahwa Ti-PAR reagen dapat digunakan untuk pengujian gratis hidrogen peroksida dan glukosa dan memiliki keunggulan dibandingkan metode lain. Tidak memerlukan penggunaan peroksidase dalam penentuan. Kehadiran peroksidase dikenal ke prompt oksidasi chromogens dan zat lain boleh. Dengan demikian, metode Ti-PAR tidak terpengaruh oleh kehadiran zat-zat yang boleh, seperti asam askorbat. Sensitivitas dari reagen Ti-PAR ini juga cukup tinggi. Temuan ini dan orang-orang yang dilaporkan oleh Matsubara et al. (1983) sangat mendukung penggunaan ini reagen untuk penentuan colorimetric jumlah jejak hidrogen peroksida dalam cairan biologis.Ti-PAR reagent, dengan demikian telah berhasil digunakan untuk menentukan jejak zat biologis dalam serum yang menggunakan kombinasi sesuai enzim untuk menghasilkan H 20 2 melalui enzim oksidasi. Matsubara dan Takamura (1980)

Hasil (Bahasa Indonesia) 2:

Metode peroksidase (M) Gambar. 5. Korelasi konsentrasi glukosa sebagai ditentukan dengan metode Ti-CGK dengan yang ditentukan oleh peroksidase-digabungkan metode PEMBAHASAN Hal ini sebelumnya dilaporkan bahwa pereaksi Ti-PAR dapat digunakan untuk mendeteksi jumlah jejak hidrogen peroksida (Matsubara et at. 1983 ). Jadi Ti-PAR reagen yang digunakan dalam percobaan ini untuk penentuan bebas hidrogen peroksida dengan reaksi oksidase glukosa. Metode itu cepat, nyaman dan direproduksi dibandingkan dengan menggunakan chromogen di hadapan peroksidase. Seperti diberitakan sebelumnya (Matsubara dan Takamura 1980) dan dikonfirmasi dalam karya ini, spektrum absorbansi ofthe Ti-PAR-H2 0 2 kompleks menunjukkan puncak dalam kisaran pH antara 7,6 dan 12,0. Absorbansi pada 508 nm adalah sebanding dengan konsentrasi ditambahkan H 20 2, mulai dari 0,5 sampai 30 ILM (Gbr. 1) dengan koefisien absorpsi molar (E) dari sekitar 3,6 x 104 M l cm-I. Nilai penyerapan konstan diperoleh dalam beberapa menit setelah penambahan hidrogen peroksida untuk reagen Ti-PAR dan tetap tidak berubah selama 24 jam pada suhu kamar. Gangguan yang disebabkan oleh adanya kelebihan Ti-PAR dapat diminimalkan dengan inkubasi pada 37 ° C selama beberapa menit. Hasil yang diperoleh dalam penelitian ini menunjukkan bahwa reagen Ti-PAR dapat digunakan untuk assay bebas hidrogen peroksida dan glukosa dan memiliki keuntungan lebih metode lain. Tidak memerlukan penggunaan peroksidase dalam penentuan. Kehadiran peroksidase diketahui meminta oksidasi chromogens dan zat direduksi lainnya. Dengan demikian, metode Ti-PAR tidak terpengaruh oleh adanya zat direduksi, seperti asam askorbat. Sensitivitas reagen Ti-PAR juga cukup tinggi. Temuan ini dan yang dilaporkan oleh Matsubara et al. (1983) sangat mendukung penggunaan reagen ini untuk penentuan kolorimetri jumlah jejak hidrogen peroksida dalam cairan biologis. The Ti-PAR reagen, sehingga telah berhasil digunakan untuk menentukan bahan biologi jejak dalam serum menggunakan kombinasi enzim yang tepat untuk menghasilkan H 20 2 melalui oksidasi enzimatik. Matsubara dan Takamura (1980)