3.3. Microorganism Strains and Anti

3.3. Microorganism Strains and Antibiotics
The alkaloid extracts of B. microphylla were tested against representative Gram-negative
and Gram-positive bacteria. The following bacteria were tested: Escherichia coli (ATCC 25922),
Salmonella typhimurium (ATCC 13311), Listeria monocytogenes (ATCC 13932), Enterobacter aerogenes
(ATCC 13084), Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Bacillus cereus (ATCC 11778), Staphylococcus
epidermidis (ATCC 12228) and Bacillus subtilis (ATCC 6633). AMP, CFL and berberine were purchased
from Sigma Aldrich (St. Louis, MO, USA), Oxoid Microbiology Products (Basingstoke, Hants, UK)
and United States Biological (Swampscott, MA, USA).
3.4. Antibacterial Assays
The susceptibility tests were performed by the Mueller–Hinton agar-well diffusion method.
The bacterial strains were grown in Muller–Hinton broth at 37

C for 12 h and adjusted to a turbidity
of 0.5 McFarland standard (1  10
8
CFU/mL). To obtain the inoculum, these suspensions were diluted
100-fold in Muller–Hinton broth to give 1  10
6
CFU/mL.
3.5. Antimicrobial Activity (Disc Diffusion Assay)
The antibacterial activities of the alkaloid extracts of B. microphylla were assayed against
Gram-negative and Gram-positive bacteria using the disc diffusion method recommended previously by
the National Committee for Clinical Laboratory Standard (CLSI 2001) and reported by Konaté et al. [20]
with slight modifications. Briefly, a suspension of the tested microorganism (0.1 mL of 1  10
CFU/mL)
was spread on solid media plates. The alkaloid compounds of B. microphylla were dissolved in 10%
dimethyl sulfoxide (DMSO) in water, and the alkaloid solution was filtered through 0.22 m Millipore
Express
®
(Billerica, MA, USA) membranes for sterile filtration. Filter paper discs (5 mm in diameter) were
impregnated with 10 L of the extracts (equivalent to 500, 1000 and 2000 g/disc) and placed on the
inoculated agar plates. The plates were incubated at 37

C for 24 h. Discs containing AMP (10 g) and
CFL (30 g) were used as positive controls, and 10% DMSO was used as a negative control.
6

Hasil (Bahasa Indonesia) 1:

3.3. mikroorganisme strain dan antibiotikEkstrak B. microphylla alkaloid diujicoba terhadap perwakilan gram-negatifdan bakteri gram-positif. Bakteri berikut diuji: Escherichia coli (ATCC 25922),Salmonella typhimurium (ATCC 13311), Listeria monocytogenes (ATCC 13932), Enterobacter aerogenes(ATCC 13084), Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Bacillus cereus (ATCC 11778), Staphylococcusepidermidis (ATCC 12228) dan subtilis Bacillus (ATCC 6633). AMP, CFL dan berberine dibelidari Sigma Aldrich (St Louis, MO, USA), Oxoid Mikrobiologi Produk (Basingstoke, Hants, Inggris)dan Amerika Serikat biologis (Swampscott, MA, USA).3.4. antibakteri tesKerentanan tes dilakukan dengan metode agar-baik difusi Mueller-Hinton.Strain bakteri yang ditanam di Muller-Hinton kaldu di 37C untuk 12 h dan disesuaikan untuk kekeruhanMcFarland 0.5 standar (1 108CFU/mL). Untuk mendapatkan inoculum, suspensi ini diencerkan100-fold di Muller-Hinton kaldu untuk memberikan 1 106CFU/mL.3.5. aktivitas antimikroba (Disc difusi Assay)Aktivitas antibakteri ekstrak alkaloid B. microphylla yang diuji terhadapBakteri gram negatif dan gram-positif yang menggunakan metode difusi disc direkomendasikan sebelumnya olehKomite Nasional klinis laboratorium standar (CLSI 2001) dan dilaporkan oleh Konaté et al. [20]dengan sedikit modifikasi. Secara singkat, suspensi mikroorganisme diuji (0, 1 mL 1 10CFU/mL)tersebar di media padat piring. Senyawa alkaloid B. microphylla yang dilarutkan dalam 10%dimetil sulfoxide (DMSO) dalam air, dan solusi alkaloid disaring melalui 0.22 m MilliporeExpress®(Billerica, MA, USA) membran untuk filtrasi steril. Filter paper cakram (5 mm diameter) yangdiresapi dengan 10 L ekstrak (setara dengan 500, 1000 dan 2000 g/disk) dan ditempatkan padapiring agar terlepas. Piring yang diinkubasi di 37C untuk 24 h. disc yang mengandung AMP (10 g) danCFL (30 g) digunakan sebagai kontrol positif, dan 10% DMSO digunakan sebagai kontrol negatif.6

Hasil (Bahasa Indonesia) 2:

3.3. Mikroorganisme Strain dan Antibiotik
Ekstrak alkaloid dari B. microphylla diuji terhadap Gram negatif perwakilan
bakteri dan Gram-positif. Bakteri berikut diuji: Escherichia coli (ATCC 25922),
Salmonella typhimurium (ATCC 13311), Listeria monocytogenes (ATCC 13932), Enterobacter aerogenes
(ATCC 13084), Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Bacillus cereus (ATCC 11778), Staphylococcus
epidermidis (ATCC 12228) dan Bacillus subtilis (ATCC 6633). AMP, CFL dan berberin yang dibeli
dari Sigma Aldrich (St Louis, MO, USA), Oxoid Mikrobiologi Produk (Basingstoke, Hants, UK)
dan Amerika Serikat Biologi (Swampscott, MA, USA).
3.4. Antibakteri Tes
Tes kerentanan dilakukan dengan metode agar-baik difusi Mueller-Hinton.
Strain bakteri ditumbuhkan dalam Muller-Hinton broth pada 37
?
C selama 12 jam dan disesuaikan dengan kekeruhan
0,5 McFarland standar (1? 10
8
CFU / mL). Untuk mendapatkan inokulum, suspensi tersebut diencerkan
100 kali lipat Muller-Hinton kaldu untuk memberikan 1? 10
6
CFU / mL.
3.5. Antimikroba Kegiatan (Disc Diffusion Assay)
Kegiatan antibakteri dari ekstrak alkaloid dari B. microphylla diuji terhadap
bakteri Gram-negatif dan Gram-positif menggunakan metode difusi disk direkomendasikan sebelumnya oleh
Komite Nasional Standar Laboratorium Klinis (CLSI 2001) dan dilaporkan oleh Konate et al. [20]
dengan sedikit modifikasi. Secara singkat, suspensi mikroorganisme diuji (0,1 mL 1? 10
CFU / mL)
tersebar di piring media padat. Senyawa-senyawa alkaloid dari B. microphylla dilarutkan dalam 10%
dimethyl sulfoxide (DMSO) dalam air, dan solusi alkaloid disaring melalui 0,22? M Millipore
Ekspres
®
membran untuk filtrasi steril (Billerica, MA, USA). Cakram kertas filter (5 mm diameter) yang
diresapi dengan 10? L dari ekstrak (setara dengan 500, 1000 dan 2000? G / disc) dan ditempatkan pada
diinokulasi agar piring. Piring diinkubasi pada 37
?
C selama 24 jam. Cakram yang mengandung AMP (10? G) dan
CFL (30? G) digunakan sebagai kontrol positif, dan 10% DMSO digunakan sebagai kontrol negatif.
6