2.2. Imobilisasi PLA1
Untuk imobilisasi PLA1, jenis PLA1 gratis dicampur dengan penyangga sodium fosfat solusi (50 mM, pH 7,5) pada berbagai rasio. Suspensi enzim diaduk pada 300 rpm selama 30 menit
dan konsentrasi protein terlarut yang ditentukan menurut Lowry, Rosebrough, Farr, dan Randall (1951) menggunakan serum albumin sapi sebagai standar. Untuk operator hidrofobik, satu gram masing-masing operator yang dibasahi dengan 20 ml etanol selama 2 jam sampai pembawa mengendap. Setelah decanting etanol, pembawa dicuci dengan 40 mL dapar natrium fosfat dan kemudian ditempatkan dalam sebuah fl meminta dengan 10 mL suspensi enzim. Imobilisasi dilakukan dalam shaker bath air beroperasi pada 200 rpm dan 30? C. Setelah gemetar selama 16 jam, suspensi itu disaring untuk memulihkan persiapan yang dihasilkan amobil enzim, yang kemudian dibilas dengan 40 ml buffer fosfat natrium dan kemudian dikeringkan pada 45? Cina vakum oven semalam, dan disimpan pada 4 ° C sampai digunakan. Tingkat fi xation (wt%) dan jumlah protein terikat dalam enzim amobil (mg / g) diperkirakan dengan mengurangi protein yang tersisa di suspensi enzim setelah imobilisasi dibandingkan dengan konsentrasi protein awal. Tingkat fiksasi (%) dan jumlah protein teradsorbsi ke pembawa (mg / g) dihitung dengan mengikuti persamaan:
Sedang diterjemahkan, harap tunggu..
