SDS-PAGE analysis of graded garlic

SDS-PAGE analysis of graded garlic sample with FKC is a preliminary study to check the effect of garlic
extract on the antigen. The*14 kDa band evident in only garlic seems to be a glycoprotein which has an
array of immunomodulatory functions including stimulation of mononuclear cells, enhancement of NK cell
activity, T-lymphocyte proliferation and enhancement of peritoneal macrophage phagocytic activity (Nikoo
et al.2008) whereas the other band has to be characterized. This result indicated that garlic has no proteolytic
effect on FKC when used in different concentrations for a varied incubation time and could be used successfully with any antigenic formulations. However, a closer look into its use with new antigen is needed
about antigenic degradability before application.
In this study, potential of this modified adjuvant was further evaluated by assessing its immunostimulatory
effect on host immunity. Fish serum causes hemolysis of heterologous red blood cells, which is due to
activation of alternative pathway of complement system. Garlic might be having some activity which could
activate the complement cascade and modulate the innate immune response at early time as well as 30 days
post-injection only at lower dose of incorporation. Similarly, previous studies have also found a dosedependent dietary effect of garlic powder in enhancing the immunity of rohu and rainbow trout, besides its
positive effects on hematological picture, growth and other serum electrolyte concentrations (Nya and Austin
2009). Lectins are also immune proteins that recognize and bind to specific carbohydrate targets. The lectin
pathway of complement system is initiated by binding of a protein complex consisting of mannose-binding
lectin (MBL) and serine proteases, mannose-binding lectin associated proteases 1 and 2 (MASP-1 and -2) to
mannans on bacterial cell surfaces, and thus its activation is independent of antibody like alternative pathway.
Lectin is also regarded as the most abundant protein in garlic (Fenwick and Hanley1985) and possibly it
might be playing role in stimulating the lectin-complement pathway leading to hemolysis of RBCs.
Agglutinins are a group of proteins present in fish serum, which can agglutinate a number of fish bacterial
pathogens. These probably have binding affinity for the carbohydrate moieties present on bacterial surface
which helps in attachment to the host. The highest agglutination titer in group treated with 10lg of garlicbased adjuvant, showed the garlic–FKC formulation could only able to raise the titer at lowest dose level on
day 30. A vaccine formulation ofA. hydrophilawith propolis induced agglutinating antibody level in carp
when injected intraperitoneally (Chu2006). In fish, antibody-mediated humoral immunity plays an important
role in defending bacterial infections. Hence, the antibody titer probably obtained here is well correlated to
degree of protection as observed from higher survival in lower dose garlic-treated fish as detailed later. The
maximum level of agglutinating antibody 30 days post-vaccination is an indication of the protective response
of the modified adjuvant for longer time period which was not seen in only FKC vaccinated group. Detection
of highest agglutinating antibody 30 days post-injection is consistent with the results of other workers
(Bastardo et al.2012). In this study, agglutinating antibody titer was also found in control group fish to some
extent. Hence the previous exposure of this fish used in this trial to the same or similar antigens/organisms
cannot be ruled out in the pond condition where there would be possible exposure to non-pathogenic microbes.
Earlier study in our laboratory suggests for the existence of natural agglutinins in Indian major carp sera at any
stage of growth (Sahoo et al.2008).
Herbal extracts are proved to reduce mortality against pathogen challenges (Ardo et al.2008). Reduction in
the mortality in rainbow trout was reported by Nya and Austin (2009) fed with different dose of garlic.
Similarly, addition of garlic at 0.1–1 % in the diet of rohu fingerlings for 60 days significantly reduced
mortality due to aeromoniasis (Sahu et al.2007). Garlic could enhance fish immunity even at lower dose when
used as dietary supplement (Sahu et al.2007). In the present study, the lowest mortality rate against A.
hydrophilachallenge was found in the group receiving FKC?MO with garlic in lower dose whereas it was
higher in the MO group as well as in the group which received vaccine formulation without garlic. The
response of the dose, i.e., B100lg of garlic might be sufficient enough to stimulate the immune effector
molecules against the pathogen. Results of hemolysin titer and challenge study of our experiment showed that
the effect of garlic treatment was more pronounced during earlier time period, i.e., 10 dpv as compared to 30
dpv, thus indicating short-lived immunomodulatory effect of the compounds viz., allicin, organo-sulfur
compounds or ajoene present in garlic extract. Hence, booster injections with this adjuvant may be more
effective to obtain pronounced effect of this compound.

Hasil (Bahasa Indonesia) 1:

Analisis SDS-halaman bawang putih dinilai sampel dengan FKC adalah studi awal untuk memeriksa efek bawang putihExtract pada antigen. * 14 kDa band jelas dalam bawang putih hanya tampaknya menjadi sebuah glikoprotein yangserangkaian fungsi imunomodulator termasuk stimulasi perlengketan sel, peningkatan sel NKaktivitas, proliferasi limfosit T dan peningkatan kegiatan fagositik peritoneal makrofag (Nikooet al.2008) sedangkan band lain harus ditandai. Hasil ini menunjukkan bahwa bawang putih memiliki tidak proteolitikefek pada FKC bila digunakan dalam konsentrasi yang berbeda untuk waktu inkubasi bervariasi dan dapat digunakan dengan sukses dengan formulasi antigen apapun. Namun, melihat lebih dekat ke penggunaan dengan antigen baru diperlukantentang antigen penguraiannya sebelum aplikasi.Dalam studi ini, potensi ajuvan modifikasi ini lebih lanjut dievaluasi dengan menilai immunostimulatory yangefek pada host kekebalan. Ikan serum penyebab hemolisis sel darah merah heterologous, yang karenaaktivasi dari jalur alternatif sistem pelengkap. Bawang putih mungkin memiliki beberapa aktivitas yang dapatmengaktifkan cascade pelengkap dan memodulasi respon imun bawaan di awal waktu serta 30 haripasca injeksi hanya pada dosis yang lebih rendah dari penggabungan. Demikian pula, penelitian sebelumnya juga menemukan efek Diet dosedependent serbuk bawang putih dalam meningkatkan imunitas rohu dan ikan trout pelangi, selain yangefek positif pada gambar hematological, pertumbuhan dan kadar elektrolit serum lainnya (Nya dan Austin2009). lectins juga protein imun yang mengenali dan mengikat untuk target spesifik karbohidrat. Lektinjalur melengkapi sistem dimulai dengan mengikat protein kompleks terdiri dari mannose-bindinglektin (MBL) dan protease serin, mengikat mannose lektin terkait protease 1 dan 2 (MASP-1 dan -2) untukmannans pada permukaan sel bakteri, dan dengan demikian aktivasi adalah independen antibodi seperti jalur alternatif.Lektin juga dianggap sebagai protein terbanyak dalam bawang putih (Fenwick dan Hanley1985) dan mungkinmungkin memainkan peran dalam merangsang jalur lektin-melengkapi yang mengarah ke hemolisis sel darah merah.Agglutinins adalah sekelompok protein hadir dalam serum ikan, yang dapat agglutinate sejumlah ikan bakteripatogen. Ini mungkin memiliki afinitas mengikat untuk gugus karbohidrat yang hadir pada bakteri permukaanyang membantu dalam Lampiran kepada Angkatan. Titer aglutinasi tertinggi dalam kelompok diperlakukan dengan 10lg dari garlicbased ajuvan, menunjukkan perumusan bawang putih-FKC bisa hanya mampu meningkatkan titer pada tingkat dosis yang terendah padahari 30. OfA formulasi vaksin. hydrophilawith propolis diinduksi tingkat antibodi agglutinating di ikanKetika disuntikkan intraperitoneally (Chu2006). Ikan, antibodi-mediated kekebalan humoral memainkan pentingperan dalam membela infeksi bakteri. Oleh karena itu, titer antibodi yang mungkin diperoleh di sini juga berkorelasi untuktingkat perlindungan seperti yang diamati dari kelangsungan hidup yang tinggi dalam dosis rendah diperlakukan bawang putih-ikan sebagai rinci nanti. Thetingkat maksimum agglutinating antibodi 30 hari pasca vaksinasi merupakan indikasi respon pelindungdari ajuvan dimodifikasi untuk waktu lebih lama jangka waktu yang tidak terlihat di hanya FKC divaksinasi kelompok. Deteksi30 hari pasca injeksi antibodi agglutinating tertinggi konsisten dengan hasil pekerja lain(Bastardo et al.2012). Dalam studi ini, agglutinating titer antibodi juga ditemukan dalam kontrol kelompok ikan untuk beberapasejauh. Karena pemaparan sebelumnya ikan ini digunakan didalam pengadilan ini untuk sama atau mirip antigen/organismetidak dapat dikesampingkan dalam kolam kondisi di mana akan ada mungkin terpapar mikroba non-patogenik.Studi sebelumnya di laboratorium kami menunjukkan keberadaan alam agglutinins di India utama gurame sera setiaptahap pertumbuhan (Sahoo et al.2008).Ekstrak herbal yang terbukti mengurangi mortalitas terhadap patogen tantangan (Ardo et al.2008). Pengurangankematian di rainbow trout dilaporkan oleh Nya dan makan Austin (2009) dengan berbagai dosis bawang putih.Demikian pula, penambahan bawang putih di 0.1-1% dalam diet petani ikan di distrik rohu selama 60 hari berkurang secara signifikankematian karena aeromoniasis (Susanto et al.2007). Bawang putih dapat meningkatkan imunitas ikan bahkan di bawah dosis ketikadigunakan sebagai suplemen (Susanto et al.2007). Dalam penelitian ini, tingkat kematian terendah terhadap A.hydrophilachallenge ditemukan di kelompok yang menerima FKC?MO dengan bawang putih di bawah dosis sedangkan itulebih tinggi dalam kelompok MO serta dalam kelompok yang menerima vaksin formulasi tanpa bawang putih. Therespon dosis, yaitu, B100lg bawang putih mungkin cukup untuk merangsang efektor kekebalanmolekul melawan patogen. Hasil tes menunjukan titer dan tantangan hemolysin studi percobaan kami menunjukkan bahwaefek dari bawang putih pengobatan lebih jelas selama periode awal waktu, yaitu 10 dpv dibandingkan dengan 30dpv, dengan demikian menunjukkan efek pendek imunomodulator senyawa viz., allicin, organo-belerangsenyawa atau ajoene hadir dalam bawang putih ekstrak. Oleh karena itu, booster suntikan dengan ajuvan ini mungkin lebihefektif untuk mendapatkan efek diucapkan bahan ini.

Hasil (Bahasa Indonesia) 2:

Analisis SDS-PAGE dari sampel dinilai bawang putih dengan FKC adalah studi pendahuluan untuk memeriksa efek dari bawang putih
ekstrak terhadap antigen. The * 14 kDa Band jelas hanya bawang putih tampaknya menjadi glikoprotein yang memiliki
berbagai fungsi imunomodulator termasuk stimulasi sel mononuklear, peningkatan sel NK
aktivitas, proliferasi T-limfosit dan peningkatan aktivitas fagositosis makrofag peritoneal (NikOo
et al.2008 ) sedangkan band lainnya harus ditandai. Hasil ini menunjukkan bahwa bawang putih memiliki proteolitik
berpengaruh pada FKC bila digunakan dalam konsentrasi yang berbeda untuk waktu inkubasi bervariasi dan dapat digunakan dengan baik bersama formulasi antigenik. Namun, melihat lebih dekat ke dalam penggunaannya dengan antigen baru diperlukan
tentang penguraian antigenik sebelum aplikasi.
Dalam penelitian ini, potensi adjuvant dimodifikasi ini dievaluasi lebih lanjut dengan menilai imunostimulan yang
berpengaruh pada kekebalan inang. Ikan serum menyebabkan hemolisis sel darah merah heterolog, yang karena
aktivasi jalur alternatif sistem komplemen. Bawang putih mungkin memiliki beberapa kegiatan yang bisa
mengaktifkan kaskade komplemen dan memodulasi respon imun bawaan pada waktu dini serta 30 hari
pasca-injeksi hanya pada dosis yang lebih rendah dari penggabungan. Demikian pula, penelitian sebelumnya juga menemukan efek diet dosedependent bubuk bawang putih dalam meningkatkan kekebalan Rohu dan trout pelangi, selain yang
efek positif pada gambar hematologi, pertumbuhan dan konsentrasi serum elektrolit lainnya (Nya dan Austin
2009). Lektin juga protein kekebalan tubuh yang mengenali dan mengikat target karbohidrat tertentu. Lektin
jalur sistem komplemen dimulai dengan pengikatan kompleks protein yang terdiri dari mannose-binding
lectin (MBL) dan protease serin, mannose-mengikat lektin terkait protease 1 dan 2 (MASP-1 dan -2) ke
mannans pada permukaan sel bakteri , dan dengan demikian aktivasi independen antibodi seperti jalur alternatif.
Lektin juga dianggap sebagai protein paling melimpah di bawang putih (Fenwick dan Hanley1985) dan mungkin itu
mungkin memainkan peran dalam merangsang jalur lektin-komplemen yang menyebabkan hemolisis sel darah merah.
aglutinin adalah kelompok protein hadir dalam serum ikan, yang dapat menggumpalkan sejumlah bakteri ikan
patogen. Ini mungkin memiliki afinitas mengikat untuk gugus karbohidrat hadir pada permukaan bakteri
yang membantu dalam lampiran tuan rumah. Tertinggi aglutinasi titer dalam kelompok diobati dengan 10lg dari adjuvant garlicbased, menunjukkan formulasi bawang putih-FKC hanya bisa mampu meningkatkan titer pada tingkat dosis terendah pada
hari 30. formulasi vaksin OFA. propolis hydrophilawith diinduksi tingkat antibodi agglutinating pada ikan mas
ketika disuntikkan intraperitoneal (Chu2006). Pada ikan, imunitas humoral antibodi-mediated memainkan penting
peran dalam membela infeksi bakteri. Oleh karena itu, titer antibodi mungkin diperoleh di sini baik berkorelasi dengan
tingkat perlindungan seperti yang diamati dari kelangsungan hidup yang tinggi dosis bawang putih yang diobati ikan rendah seperti yang dijelaskan nanti. The
tingkat maksimum agglutinating antibodi 30 hari pasca-vaksinasi merupakan indikasi respon protektif
dari adjuvant dimodifikasi untuk jangka waktu yang lebih lama yang tidak hanya terlihat di FKC kelompok yang divaksinasi. Deteksi
dari agglutinating tertinggi antibodi 30 hari pasca-injeksi konsisten dengan hasil pekerja lain
(Bastardo et al.2012). Dalam penelitian ini, agglutinating titer antibodi juga ditemukan pada ikan kelompok kontrol beberapa
tingkat. Oleh karena itu paparan sebelumnya ikan ini digunakan dalam uji coba ini dengan antigen yang sama atau serupa / organisme
tidak dapat dikesampingkan dalam kondisi kolam di mana akan ada kemungkinan paparan mikroba non-patogen.
studi sebelumnya di laboratorium kami menunjukkan keberadaan alam aglutinin di India sera ikan mas besar pada setiap
tahap pertumbuhan (Sahoo et al.2008).
ekstrak herbal yang terbukti menurunkan angka kematian terhadap tantangan patogen (Ardo et al.2008). Pengurangan
angka kematian pada rainbow trout dilaporkan oleh Nya dan Austin (2009) makan dengan dosis yang berbeda dari bawang putih.
Demikian pula, penambahan bawang putih di 0,1-1% dalam diet benih Rohu selama 60 hari secara signifikan mengurangi
kematian akibat aeromoniasis (Sahu et al.2007). Bawang putih bisa meningkatkan kekebalan ikan bahkan pada dosis rendah bila
digunakan sebagai suplemen makanan (Sahu et al.2007). Dalam penelitian ini, tingkat kematian terendah terhadap A.
hydrophilachallenge ditemukan pada kelompok yang mendapat FKC? MO dengan bawang putih dalam dosis yang lebih rendah sedangkan itu
lebih tinggi pada kelompok MO serta dalam kelompok yang menerima formulasi vaksin tanpa bawang putih. The
respon dosis, yaitu, B100lg bawang putih mungkin cukup untuk merangsang efektor imun
molekul terhadap patogen. Hasil hemolisin titer dan studi tantangan percobaan kami menunjukkan bahwa
efek dari pengobatan bawang putih lebih jelas selama periode waktu sebelumnya, yakni 10 DPV dibandingkan dengan 30
DPV, yang mengindikasikan efek imunomodulator singkat dari senyawa yaitu, allicin, organo-sulfur
senyawa atau ajoene hadir dalam ekstrak bawang putih. Oleh karena itu, suntikan penguat dengan adjuvant ini mungkin lebih
efektif untuk mendapatkan efek diucapkan senyawa ini.