Sensitivitas dari pemisahan (waktu retensi) terhadap perubahan
dalam MeOH dan Na2HPO4 adalah yang terendah di hanya 0,001, menunjukkan
bahwa MeOH dan Na2HPO4 tidak cocok karena pemisahan
antara INH dan PZA tidak bisa
achieved..The penggunaan MeOH dan Na2HPO4
dalam berbagai rasio mengakibatkan retensi dekat
kali untuk INH dan PZA, dengan kurangnya
resolusi awal antara kedua
puncak. Meskipun tingkat kecil pemisahan
antara INH dan PZA ditemukan,
resolusi dasar yang memadai tidak bisa
dicapai. Retensi (jelas
hidrofobik) dari RIF meningkat dengan
rasio peningkatan larutan buffer dan menurun dengan
meningkatnya rasio pelarut. RIF dan PZA berdua larut dalam
MeOH dan peningkatan rasio MeOH akan menurunkan mereka
retensi. ACN, dan terutama tBAH, menunjukkan pengaruh yang lebih besar
pada pemisahan kromatografi PZA dan INH, dan
penyelidikan lebih lanjut dilakukan menggunakan ACN sebagai pelarut
dan tBAH sebagai buffer (Tabel IV). Penggunaan tBAH
menghasilkan peningkatan pemisahan antara INH dan PZA. The
penyesuaian pH akan lebih mengoptimalkan pemisahan. The
kondisi kromatografi yang sama untuk fase gerak
pembangunan yang diterapkan, kecuali pH diubah. Tabel V
menunjukkan pengaruh pH pada fase gerak yang dipilih.
Semua komposisi fase seluler yang tercantum pada Tabel V diproduksi
hasil pemisahan yang baik, membuktikan bahwa metode menunjukkan
kekasaran diterima. Seperti di sebagian besar sistem fase-balik,
retensi dan selektivitas dikontrol oleh konsentrasi
dan sifat pengubah organik, pH, dan pada tingkat lebih rendah,
konsentrasi dan sifat buffer. Pemisahan terbaik
diproduksi dengan menggunakan fase gerak yang terdiri dari
ACN-tBAH (42,5: 57,5, v / v). (0.0002M), dengan pH akhir 3.10
Namun, kisaran pH 3,10-3,40 juga diterima.
Setelah enam suntikan, waktu retensi yang ditemukan menjadi 2,85
± 0,01, 3,54 + 0,01, dan 10,97 + 0,01 menit untuk RIF, INH, dan
PZA, masing-masing, ketika menggunakan kondisi yang dijelaskan dengan
set pH 3,1.
Sedang diterjemahkan, harap tunggu..