Fekunditas
Untuk menyelidiki fekunditas dan pemupukan
keberhasilan ikan zebra dewasa, pemijahan nampan ditempatkan ke semua kontrol dan uji
tank untuk mendorong perilaku pemijahan. Satu jam
setelah lampu telah pergi di pagi hari;
menelurkan telur yang dikumpulkan dari pemijahan
nampan dan dihitung setiap hari. Fekunditas
penelitian dilakukan untuk kedua kontrol dan
ikan eksperimental sebelum deltametrin eksposur
selama 6 hari dan selama periode paparan
enam hari. Jumlah dibuahi dan tidak dibuahi
telur dihitung dan dicatat.
pengambilan sampel darah, persiapan plasma dan
analisis hormon
Setelah enam hari dari paparan DM,
darah dikumpulkan oleh khasiat anestetik dengan
MS-222 (garam methanesulfonate; Sigma). Segera
setelah anestesi, yang ekor
batang diputuskan melintang, dan
darah diambil dari ekor arteri / vena
dengan mikrohematokrit kapiler heparinized
tabung. Volume yang sama dari penyangga aprotinin
(6μg / ml dalam fosfat buffer saline) telah
ditambahkan ke dalam tabung microcapillary, dan plasma
dipisahkan dari darah oleh sentrifugasi
pada 1500rpm selama 5 menit. Setelah kapiler ini
tabung yang beku-kering dalam nitrogen cair dan
disimpan pada -80 ° C sampai analisis lebih lanjut. Hormon
yaitu vitellogenin, 17β estradiol dan
11-ketotestosterone dianalisis dengan menggunakan kit
dari laboratorium biosense, Norwegia (Cayman
kimia perusahaan) oleh enzim-linked immunosorbent
assay (ELISA) menggunakan μQuant
pembaca piring dari Bio-Tek, USA. Protokol
yang disediakan oleh produsen diikuti
secara terpisah untuk masing-masing hormon.
Koleksi gonad untuk pengolahan histologis
Setelah pengumpulan darah dan organ reproduksi
telah dihapus dari laki-laki dan perempuan dan
difiksasi dalam larutan Bouin dunia (0,9% asam picric,
9% formalin dan 5% asetat AC id). Histologis
pengolahan dilakukan menyusul
prosedur yang diberikan oleh Nolan et al,
(2001). Jaringan singkat diganti dengan 70%
termetilasi semangat industri (IMS). Proses ini
diulang beberapa kali untuk menghilangkan
kelebihan asam picric dan disimpan pada suhu 4 ° C. Kemudian
mereka dehidrasi dengan meningkatnya IMS
(masing-masing 70% 90% 95% dan 100%),
dibersihkan dengan xylene dan kemudian tertanam dalam
lilin parafin. Mereka memotong menggunakan rotary
mikrotom (tipe No.RM2125RTF, leica Microsystems,
Cina) dengan pakai mikrotom
pisau (Shandon, MB35) dan kemudian
diwarnai dengan hematoksilin dan eosin (H & E).
Photomicrographs diambil menggunakan magnus
(MLX) peralatan.
Analisis statistik
Data dianalisis secara statistik menggunakan
DMR (multiple kisaran Duncan) test.The
nilai P <0,05 digunakan sebagai kriteria untuk statistik
signifikansi (Duncan, 1955). Semua data
dinyatakan sebagai mean ± SD (n = 8).
Sedang diterjemahkan, harap tunggu..
