Assay Metode
Estradiol
Untuk menganalisis ekstrak kotoran dari burung enggang perempuan, sebuah RIA estradiol yang digunakan sebagai
dijelaskan sebelumnya [Medler dan Lance, 1998]. Uji estradiol adalah
modifikasi dari 125I assay kit (Diagnostik Produk Corp, Los Angeles, CA).
Dua mikroliter ekstrak kotoran dilarutkan dikombinasikan dengan estradiol
antiserum, diikuti dengan inkubasi 2-jam pada suhu kamar. kemudian ditambahkan dan sampel diinkubasi selama satu jam pada suhu kamar. Penambahan 0,5 ml larutan dekstran arang dese mengakhiri kompetitif reaksi dengan memisahkan terikat dari hormon gratis. Setelah inkubasi 10-min, yang sampel disentrifugasi selama 15 menit pada suhu kamar di 1.500 g. Kemudian 700 ml supernatan yang dipipet ke 12 75 mm tabung reaksi, dan dihitung dalam gamma? counter. ekstrak tinja yang encer serial (0-1: 256) dan dianalisis dalam uji estradiol menghasilkan paralel kurva ke estradiol yang standar (r¼0.9755). The Koefisien intra-assay variasi adalah 9% dan 10% pada 20% dan 70% mengikat (n¼18 dan 20), masing-masing. Koefisien interassay variasi adalah 20% untuk ketiga kontrol yang disediakan. Sensitivitas uji dihitung pada 1,29 pg / tabung. kromatografi cair bertekanan tinggi (HPLC) pemisahan ekstrak fecal mengungkapkan radioaktif elusi estradiol-17-beta lebih polar dengan dua tabung (2 menit) dari puncak immunoreactive. Struktur yang tepat dari estrogen ini senyawa tidak diidentifikasi lebih lanjut.
Sedang diterjemahkan, harap tunggu..