Aktivasi Proenteropeptidase oleh Trypsin-Proenteropeptidase (50 nM) di 20 mM Tris-HCl, pH 7,6, 150 mM NaCl, dan 5 mM CaCl2 dihangatkan sampai 37 ° C, dan tripsin ditambahkan ke konsentrasi akhir 1 atau 5 nM. Sampel dihapus pada interval, dan reaksi diakhiri baik dengan menambahkan sampel buffer loading (2% SDS dan 2% bmercaptoethanol) untuk analisis dengan SDS-PAGE (15) dan perak pewarnaan (16) atau dengan menambahkan ovomucoid untuk konsentrasi akhir 50 nM untuk pengujian enteropeptidase diaktifkan dengan GD4K-NA (17). Urutan asam amino amino-terminal diaktifkan HL-BEK dan L-BEK ditentukan setelah SDS-PAGE dan electroblotting ke sebuah poliviniliden difluorida
membran seperti yang dijelaskan sebelumnya (18).
Sedang diterjemahkan, harap tunggu..
