Global hypomethylation of DNA has b

Global hypomethylation of DNA has been demonstrated in various human tumors (7, 10) and during rat or mouse hepatocarcinogenesis (9, 25). DNA hypomethylation is, in fact, thought to be an early event in human carcinogenesis (7) and is associated with genetic instability in cancer cells (28). Similarly, changes in DNA methylation patterns are common in cultured tumor cell lines and primary tumor cells (5, 6). Our results show that genomic DNA methylation was substantially decreased concurrently with arsenic transformation, and that these decreases are dose related, dependent on exposure intervals, and inheritable. All these factors are consistent with DNA methylation as an epigenetic mechanism for carcinogenesis in which aberrant gene expression could alter phenotype in the absence of gene mutation (25, 29–31). Alterations in DNA methylation patterns can be fixed during DNA replication and evidence suggests that methylation status of a gene can participate, with other gene control mechanisms, to balance the transcriptional level of the gene (25). Hypomethylation is associated with activation of various oncogenes during cancer development, such as c-myc, c-fos, and H-ras in human and rat liver tumors (5, 6) and raf (32) in mouse liver tumors. Additionally, c-myc overexpression is correlated with its specific hypomethylation in HL-60 cells (33) and in early rat liver tumors (34). Chronic depletion of cellular SAM contents or blockade of SAH hydrolysis, which both result in reductions of SAM/SAH ratio, also result in an overexpression of c-myc (33, 34). DNA hypomethylation occurring during hepatocarcinogenesis with nongenotoxic agents can similarly facilitate oncogene activation (25). Although acute arsenic exposure induces expression of a variety of genes (35–39), including oncogenes, it is clear that such activations are not due to the direct DNA effects such as base mutation. Arsenic, at nontoxic doses, is typically nongenotoxic and evidence indicates the metalloid generally does not cause mutations in either mammalian or bacterial systems (11–14). The evidence for the existence of a threshold for arsenic carcinogenesis in human populations (40, 41) is similarly in keeping with an epigenetic mechanism of carcinogenesis.

The expression of MT genes is clearly dependent on DNA methylation status (8) and the gene activity and responsiveness to inducing stimuli are dramatically increased after exposure to hypomethylating agents, such as the pyrimidine analogue 5-aza-cytidine (8, 21, 40). If the 5′-flanking regions of the MT gene are highly methylated, it will be poorly expressed and minimally reactive to inducing stimuli, making the inducibility of this gene a strong indicator of DNA hypomethylation, as recently demonstrated (42, 43). Our results clearly indicate that in arsenic-transformed cells, the MT gene is hyperinducible, indicative of hypomethylation as a basis for aberrant gene expression. In sharp contrast, the MT gene is actually down-regulated in liver tumors induced with the highly mutagenic, alkylating carcinogen, N-nitrosodiethylamine (44, 45), or in TRL 1215 cells that have undergone spontaneous transformation with repeated passage, an event likely due to spontaneous mutation and subsequent clonal expansion (46). This indicates that the hyperinducibility of the MT gene seen in association with arsenic-induced transformation is not simply due to DNA hypomethylation occurring during rapid cell proliferation from limitations in the capacity or fidelity of DNA maintenance methylation (47). Taken together, these results strongly point toward hypomethylation of DNA as the causative factor in arsenic-induced malignant transformation.

Hasil (Bahasa Indonesia) 1:

Global hypomethylation DNA telah ditunjukkan dalam berbagai tumor manusia (7, 10) dan selama tikus atau mouse hepatocarcinogenesis (9, 25). DNA hypomethylation, pada kenyataannya, diperkirakan awal acara di manusia karsinogenesis (7) dan dikaitkan dengan genetik ketidakstabilan dalam sel-sel kanker (28). Demikian pula, perubahan dalam DNA metilasi pola umum di jalur sel tumor berbudaya dan sel-sel tumor primer (5, 6). Hasil kami menunjukkan bahwa metilasi DNA genom secara substansial menurun dengan arsenik transformasi, dan bahwa ini mengurangi dosis terkait, tergantung pada interval eksposur, dan diwariskan. Semua faktor ini konsisten dengan DNA metilasi sebagai sebuah mekanisme epigenetik jadi yang disebut karsinogenesis di mana ekspresi gen menyimpang bisa mengubah fenotipe dalam ketiadaan mutasi gen (25, 29-31). Perubahan dalam pola-pola metilasi DNA dapat tetap selama replikasi DNA dan bukti menunjukkan bahwa status metilasi gen dapat berpartisipasi, dengan mekanisme kontrol gen lain, untuk menyeimbangkan tingkat transcriptional gen (25). Hypomethylation ini terkait dengan aktivasi onkogen berbagai selama perkembangan kanker, seperti c-myc, c-fos, dan H-ras manusia dan tumor hati tikus (5, 6) dan raf (32) di mouse hati tumor. Selain itu, c-myc berlebih berkorelasi dengan hypomethylation yang spesifik di HL-60 sel (33) dan di awal tikus hati tumor (34). Kronis penipisan selular SAM isi atau blokade dari hidrolisis SAH, yang keduanya mengakibatkan pengurangan SAM/SAH rasio, juga mengakibatkan berlebih dari c-myc (33, 34). Hypomethylation DNA yang terjadi selama hepatocarcinogenesis dengan nongenotoxic agen juga dapat memfasilitasi aktivasi onkogen (25). Meskipun pemaparan arsenik akut menginduksi ekspresi dari berbagai gen (35-39), termasuk onkogen, itu jelas bahwa aktivasi tersebut tidak karena langsung DNA efek seperti dasar mutasi. Arsenik, di dosis tidak beracun, biasanya nongenotoxic dan bukti menunjukkan metalloid umumnya tidak menyebabkan mutasi dalam sistem mamalia atau bakteri (11-14). Bukti bagi keberadaan ambang batas untuk arsenik karsinogenesis di populasi manusia (40, 41) yang juga sesuai dengan mekanisme epigenetik jadi yang disebut karsinogenesis.The expression of MT genes is clearly dependent on DNA methylation status (8) and the gene activity and responsiveness to inducing stimuli are dramatically increased after exposure to hypomethylating agents, such as the pyrimidine analogue 5-aza-cytidine (8, 21, 40). If the 5′-flanking regions of the MT gene are highly methylated, it will be poorly expressed and minimally reactive to inducing stimuli, making the inducibility of this gene a strong indicator of DNA hypomethylation, as recently demonstrated (42, 43). Our results clearly indicate that in arsenic-transformed cells, the MT gene is hyperinducible, indicative of hypomethylation as a basis for aberrant gene expression. In sharp contrast, the MT gene is actually down-regulated in liver tumors induced with the highly mutagenic, alkylating carcinogen, N-nitrosodiethylamine (44, 45), or in TRL 1215 cells that have undergone spontaneous transformation with repeated passage, an event likely due to spontaneous mutation and subsequent clonal expansion (46). This indicates that the hyperinducibility of the MT gene seen in association with arsenic-induced transformation is not simply due to DNA hypomethylation occurring during rapid cell proliferation from limitations in the capacity or fidelity of DNA maintenance methylation (47). Taken together, these results strongly point toward hypomethylation of DNA as the causative factor in arsenic-induced malignant transformation.

Hasil (Bahasa Indonesia) 2:

Hypomethylation global DNA telah dibuktikan dalam berbagai tumor manusia (7, 10) dan selama tikus atau mouse hepatocarcinogenesis (9, 25). DNA hypomethylation adalah, pada kenyataannya, dianggap sebuah acara awal karsinogenesis manusia (7) dan berhubungan dengan ketidakstabilan genetik pada sel-sel kanker (28). Demikian pula, perubahan pola metilasi DNA yang umum di sel tumor berbudaya dan sel tumor primer (5, 6). Hasil kami menunjukkan bahwa DNA genom metilasi secara substansial menurun bersamaan dengan transformasi arsenik, dan bahwa penurunan ini dosis terkait, tergantung pada interval paparan, dan diwariskan. Semua faktor ini konsisten dengan metilasi DNA sebagai mekanisme epigenetik untuk karsinogenesis di mana ekspresi gen menyimpang bisa mengubah fenotipe dengan tidak adanya mutasi gen (25, 29-31). Perubahan dalam pola metilasi DNA dapat diperbaiki selama replikasi DNA dan bukti menunjukkan bahwa status metilasi gen dapat berpartisipasi, dengan mekanisme kontrol gen lainnya, untuk menyeimbangkan tingkat transkripsi gen (25). Hypomethylation dikaitkan dengan aktivasi berbagai onkogen selama perkembangan kanker, seperti c-myc, c-fos, dan H-ras di tumor hati manusia dan tikus (5, 6) dan raf (32) di tumor hati tikus. Selain itu, c-myc berlebih berkorelasi dengan hypomethylation spesifik di HL-60 sel (33) dan tumor hati tikus awal (34). Penipisan kronis isi SAM seluler atau blokade SAH hidrolisis, yang keduanya menghasilkan penurunan rasio SAM / SAH, juga mengakibatkan berlebih dari c-myc (33, 34). Hypomethylation DNA terjadi selama hepatocarcinogenesis dengan agen nongenotoxic sama dapat memfasilitasi aktivasi onkogen (25). Meskipun paparan arsenik akut menginduksi ekspresi berbagai gen (35-39), termasuk onkogen, jelas bahwa aktivasi tersebut tidak disebabkan oleh efek DNA langsung seperti dasar mutasi. Arsen, pada dosis tidak beracun, biasanya nongenotoxic dan bukti menunjukkan metalloid umumnya tidak menyebabkan mutasi pada sistem baik mamalia atau bakteri (11-14). Bukti keberadaan ambang batas untuk arsenik karsinogenesis pada populasi manusia (40, 41) adalah sama sesuai dengan mekanisme epigenetik karsinogenesis. Ekspresi gen MT jelas tergantung pada status metilasi DNA (8) dan aktivitas gen dan tanggap terhadap menginduksi rangsangan secara dramatis meningkat setelah terpapar agen Hypomethylating, seperti pirimidin analog 5-aza-cytidine (8, 21, 40). Jika daerah 5'-mengapit gen MT sangat alkohol, itu akan buruk diungkapkan dan minimal reaktif untuk merangsang rangsangan, membuat inducibility gen ini merupakan indikator kuat dari hypomethylation DNA, baru-baru ini menunjukkan (42, 43). Hasil kami jelas menunjukkan bahwa dalam sel arsenik-berubah, gen MT adalah hyperinducible, indikasi hypomethylation sebagai dasar untuk ekspresi gen menyimpang. Dalam kontras yang tajam, gen MT sebenarnya turun-diatur dalam tumor hati yang diinduksi dengan sangat mutagenik, alkylating karsinogen, N-nitrosodiethylamine (44, 45), atau di TRL 1215 sel-sel yang telah mengalami transformasi spontan dengan berlalunya diulang, peristiwa kemungkinan karena mutasi spontan dan ekspansi klonal berikutnya (46). Hal ini menunjukkan bahwa hyperinducibility gen MT dilihat dalam hubungan dengan transformasi arsenik yang disebabkan bukan hanya karena DNA hypomethylation terjadi selama proliferasi sel yang cepat dari keterbatasan dalam kapasitas atau kesetiaan pemeliharaan DNA metilasi (47). Secara bersama-sama, hasil ini sangat mengarah ke hypomethylation DNA sebagai faktor penyebab dalam transformasi maligna arsenik diinduksi.