Integration of plasmid DNA into the

Integration of plasmid DNA into the genome
of C. glycerinogenes
The integration of the phleomycin-resistance
gene into the genome of transformants was verified
by PCR and Southern blot (Figure 2). If the
disruption cassette was integrated at the targeted
locus, the 0.96 kb fragment corresponding from Tf
to Tr should be amplified by PCR (Figure 1). As
indicated in Figure 2A, diagnostic PCR with primers
Tf and Tr using genomic DNA of phleomycinresistance
transformants as template showed that
0.96 kb product was amplified, whereas no product
was found using untransformed C. glycerinogenes
genomic DNA (Figure 2a). Southern blot revealed
that eight of nine colonies had only one band
and only one clone had two bands, which indicated
that integration of only a single copy of the phleomycin-resistance
gene occurred in most instances
(Figure 2b). Untransformed C.

Hasil (Bahasa Indonesia) 1:

Integrasi plasmid DNA ke dalam genomdari C. glycerinogenesIntegrasi phleomycin-perlawanangen ke dalam genom transformants diverifikasioleh PCR dan Selatan blot (gambar 2). Jikagangguan kaset terintegrasi di ditargetkanlokus, fragmen 0,96 kb yang sesuai dari Tfuntuk Tr harus diperkuat oleh PCR (gambar 1). Sebagaiditunjukkan dalam gambar 2A, diagnostik PCR dengan primersTF dan Tr menggunakan DNA genom dari phleomycinresistancetransformants sebagai template menunjukkan bahwaProduk 0,96 kb ini diperkuat, sedangkan tidak ada produkitu ditemukan menggunakan untransformed C. glycerinogenesDNA genom (gambar 2a). Selatan blot mengungkapkanbahwa delapan dari sembilan koloni memiliki hanya satu banddan hanya satu klon memiliki dua band, yang menunjukkanintegrasi yang hanya satu salinan phleomycin-perlawanangen terjadi dalam kebanyakan kasus(Gambar 2b). Untransformed C.