SUBJECTS AND METHODSHuman subject s

SUBJECTS AND METHODS
Human subject study The protocol of this study was approved by the Human Investigation Committee (Wayne State University, Detroit, MI). Forty healthy, elderly subjects of both sexes (aged 56–83 y) and
inclusive of all ethnic groups from St Patrick’s Senior Citizen Center (Detroit, MI) were recruited to participate in a randomized, placebo-controlled trial of the efficacy of zinc supplementation on
CRP, oxidative stress markers, inflammatory cytokines, and endothelial cell adhesion molecules in elderly subjects. A complete chart review of each elderly subject was done by the research nurse
to determine his or her potential eligibility for the study. Exclusion criteria were described previously (7). We excluded those individuals who were self-supplementing zinc, noncompetent, or who did not understand and could not sign the informed consent. All of our elderly subjects were mobile without any other type of aid. The human subject study was conducted from September 2004 to December 2006.
Elderly subjects were randomly assigned to a zinc or placebo group in pairs. Briefly, subjects were assigned to the zinc or placebo group in pairs by the technician’s blinded choice of 1 of 2 identical bottles labeled as the study drug (ie, not labeled as zinc or placebo): one bottle contained zinc pills, and the other bottle contained placebo pills. The order of assignment (ie, zinc or placebo) within pairs was random, and the persons caring for the subjects were blinded to the assignment. The zinc-supplemented
group received 45 mg zinc for 6 mo. One capsule of zinc gluconate (15 mg elemental zinc)/d was taken 1 h before breakfast, and 2 capsules were taken before going to bed ( 2 h after dinner or last meal). The placebo group received the placebo capsules in the same manner as the zinc-supplemented group. Both zinc and placebo capsules were supplied by Labcatal Laboratories (Paris, France). The Recommended Dietary Allowance for zinc (intake of 15 mg zinc/d for men and 12 mg zinc/d women) was established
in 1974 for the first time. A daily intake of .50 mg zinc/d for 12 wk may induce copper deficiency (11, 12). We used 45 mg zinc/d as supplementation in elderly individuals for 1 y, and at this concentration, the copper status remained normal. This dose of zinc was effective in correcting immune dysfunction (7).
Also, oxidative stress markers and the generation of inflammatory cytokines were decreased at this level of supplementation (7). The only adverse effect of oral zinc supplementation in amounts .50 mg zinc/d is copper deficiency, which can be easily corrected by supplementation of 2 mg copper/d. In a study
conducted by the National Eye Institute (National Institutes of Health, Bethesda, MD), 80 mg zinc/d as an oxide was used to prevent blindness in patients with age-related macular degeneration, and for 10 y no substantial side effects were observed; in the study, 2 mg copper/d was also supplemented to prevent the
deficiency of copper (13, 14). In the current study, blood was drawn from each elderly subject
before and after 6 mo of supplementation to evaluate the concentrations of plasma zinc, CRP, oxidative stress markers, inflammatory cytokines, and endothelial cell adhesion molecules. Plasma zinc was assayed by flameless atomic absorption spectrophotometry (7). Plasma lipid peroxidation byproducts,
malondialdehyde and hydroxyalkenals (MDA+HAE), were measured by using a thiobarbituric acid lipid peroxidation assay kit (Oxford Biochemical Research, Oxford, MI); plasma highsensitivity CRP (hsCRP) was assessed by enzyme-linked immunosorbent assay (Alpco Diagnostics, Windham, NH); plasma
antioxidant power was measured by the ABEL antioxidant test kit (Knight Scientific, Plymouth, United Kingdom); plasma IL-6, MCP-1, secretory phospholipase A2 (sPLA), soluble vascular cell
adhesion molecule (sVCAM)-1, soluble intercellular adhesion molecule (sICAM)-1, and soluble E-selectin (sE-selectin) were assayed by enzyme-linked immunosorbent assay kits (R&D
Systems, Minneapolis, MN) at baseline and at the end of 6 mo of supplementation. Inflammation generates oxidative stress by increasing reactive oxygen species (ROS), which results in the
oxidation of biological molecules including LDL. Oxidized LDL activates NF-jB and up-regulates its downstream target genes, such as inflammatory cytokines, CRP, adhesion molecules, inducible nitric oxide synthase, cyclooxygenase 2, fibrinogen, and tissue factor. These cytokines and molecules attract more blood cells and platelets for coagulation, which initiate the development of atherosclerosis. Increasing evidence shows that CRP; inflammatory cytokines such as IL-6 and MCP-1; adhesion molecules such as VCAM, ICAM, and E-selectin; sPLA; and lipid peroxidation byproducts are associated with the development and progression of atherosclerosis (2, 15–22). Patients with atherosclerosis
or cardiovascular disease risk factors have increased concentrations of these inflammatory cytokines or molecules. Therefore, we selected these markers to measure the effect of zinc supplementation
in our study. Cell culture study To support the evidence that zinc may have an atheroprotective
function, we used human aortic endothelial cells (HAECs), the human promyelocytic leukemia cell line HL-60, which differentiates into monocytes after stimulation, and the human monocyticleukemia cellline THP-1 to measure oxidativestress markers, inflammatory cytokines, A20, PPAR-a, and NF-jB activation
under zinc-deficient and zinc-sufficient conditions. Zinc-deficient medium was prepared by removing zinc from fetal bovine serum (FBS) used with culture medium as described previously (23). We
developed zinc-deficient medium to simulate in vivo zinc deficiency in humans so that differences between zinc-deficient and zinc-sufficient cells could be characterized in the cultured cells
(23). For each cellline, we monitored the developmentof deficiency on a daily basis, such as cell growth and/or cellular zinc content, and established the optimum number of days required for culture in
zinc-deficient medium to obtain zinc-deficient viable cells. Zincdeficient (1lmol Zn/L) and zinc-sufficient (15lmol Zn/L, physiologic condition) media differed only in their zinc content. HL-60 (CCL-240; American Type Culture Collection, Manassas, VA) cells were maintained in 10% normal FBS (without
chelation)-RPMI-1640 medium, as described previously (23). THP-1 (TIB-202; American Type Culture Collection) cells were maintained in 10% normal FBS (without chelation)-RPMI-1640 medium supplemented with 10 mmol/L HEPES at 37 C. HAECs (Cascade Biologics, Portland, OR) were maintained in 2% normal FBS (without chelation)-medium 200 supplemented with 10lg heparin/mL, 10 ng human epidermal growth factor/ mL, 3 ng basic fibroblast growth factor/mL, and 1lg hydrocortisone/mL (Cascade Biologics) at 37 C.A total of 2•105 cells/mL were separated into 2 groups. One set of cells was transferred to zinc-deficient medium, and the other set was transferred to zinc-sufficient medium. The cells in either zinc-deficient or zinc-sufficient medium were incubated
for 10 d (HL-60 cells), 8 d (THP-1 cells), and 6 d (HAECs) to develop zinc-deficient and zinc-sufficient conditions. The viability of those cells incubated in either zinc-deficient or zincsufficient medium was 83–86% for HAECs and 89–94% for HL-60 and THP-1 cells. There was no significant difference between zinc-deficient and zinc-sufficient cells (P.0.05). After 24 h of stimulation with oxidized LDL (oxLDL, 50lg/mL; Biomedical Technologies, Stoughton, MA), zinc-deficient and zinc-sufficient cells were harvested for Western blot analysis or NF-jB activation by electrophoretic mobility shift assay (EMSA) and reporter-gene luciferase assays. The media were collected for the assessment of lipid peroxidation byproducts and generation of inflammatory cytokines as described. The details of

Hasil (Bahasa Indonesia) 1:

MATA PELAJARAN DAN METODESubjek manusia studi protokol penelitian ini telah disetujui oleh Komite penyelidikan manusia (Wayne State University, Detroit, MI). Empat puluh subyek sehat, tua dari kedua jenis kelamin (umur 56-83 y) dantermasuk semua suku dari St Patrick warga Senior Center (Detroit, MI) direkrut untuk berpartisipasi dalam percobaan acak, plasebo-terkontrol efektivitas pemberian zink padaCRP, tanda-tanda stres oksidatif, sitokin-sitokin inflamasi dan sel endotel adhesi molekul dalam mata pelajaran yang tua. Review lengkap bagan setiap subyek tua dilakukan oleh penelitian perawatuntuk menentukan kelayakan potensi nya untuk studi. Kriteria pengecualian yang dijelaskan sebelumnya (7). Kami tidak termasuk orang-orang yang mandiri yang melengkapi seng, noncompetent, atau yang tidak mengerti dan tidak bisa menandatangani persetujuan. Semua mata pelajaran kami tua yang mobile tanpa jenis bantuan lainnya. Subjek manusia penelitian ini September 2004-Desember 2006.Tua subyek ditugaskan secara acak untuk grup seng atau plasebo berpasangan. Secara singkat, subyek ditugaskan untuk seng atau kelompok plasebo berpasangan oleh teknisi yang membutakan pilihan 1 2 botol identik yang dicap sebagai obat studi (yaitu, tidak dicap sebagai seng atau plasebo): satu botol berisi seng pil, dan pil plasebo botol berisi lainnya. Urutan tugas (yaitu, seng atau plasebo) dalam pasangan adalah acak, dan orang-orang yang peduli untuk mata pelajaran yang buta terhadap tugas. Seng-dilengkapiGroup menerima 45 mg seng untuk 6 mo. Satu capsule dari seng glukonat (15 mg seng elemental) bumi diambil 1 h sebelum sarapan, dan 2 kapsul diambil sebelum tidur (2 h setelah makan malam atau Sahur). Kelompok plasebo menerima plasebo kapsul dengan cara yang sama sebagai kelompok dilengkapi seng. Seng dan plasebo kapsul yang disediakan oleh laboratorium Labcatal (Paris, Perancis). Recommended Dietary Allowance untuk zinc (asupan 15 mg seng/d untuk pria dan wanita seng/d 12 mg) didirikanpada tahun 1974 untuk pertama kalinya. Asupan harian 50 mg seng/d untuk 12 wk dapat menyebabkan kekurangan tembaga (11, 12). Kami menggunakan 45 mg seng/d sebagai suplemen di lansia individu untuk 1 y, dan konsentrasi ini, status tembaga tetap normal. Dosis ini seng adalah efektif dalam mengoreksi disfungsi kekebalan (7).Juga, tanda-tanda stres oksidatif dan generasi sitokin-sitokin inflamasi yang menurun pada tingkat suplementasi (7). Efek hanya merugikan suplemen oral zinc dalam jumlah 50 mg seng/d adalah defisiensi tembaga, yang dapat dengan mudah diperbaiki oleh suplementasi tembaga 2 mg/d. Dalam sebuah studidilakukan oleh National Eye Institute (Institut Kesehatan Nasional, Bethesda, MD), 80 mg seng/d sebagai oksida digunakan untuk mencegah kebutaan pada pasien dengan degenerasi makula terkait usia, dan 10 y tanpa efek samping yang besar yang diamati; dalam studi, tembaga 2 mg/d juga dilengkapi untuk mencegahdefisiensi tembaga (13, 14). Dalam studi ini, darah diambil dari setiap mata pelajaran yang tuasebelum dan setelah 6 mo suplemen untuk mengevaluasi konsentrasi plasma seng, CRP, tanda-tanda stres oksidatif, sitokin-sitokin inflamasi dan sel endotel adhesi molekul. Plasma seng diuji oleh Spektrofotometri serapan atom flameless (7). Plasma lipid peroxidation produk sampingan,malondialdehyde dan hydroxyalkenals (MDA + HAE), diukur dengan menggunakan thiobarbituric asam lemak peroxidation assay kit (penelitian biokimia di Oxford, Oxford, MI); plasma highsensitivity CRP (hsCRP) dinilai oleh enzim-linked immunosorbent assay (Alpco diagnostik, Windham, NH); plasmakekuatan antioksidan diukur oleh ABEL antioksidan test kit (Knight Scientific, Plymouth, Inggris Raya); plasma IL-6, MCP-1, sekresi phospholipase A2 (sPLA), sel vaskular larutadhesi molekul (sVCAM) -1, larut interselular adhesi molekul (sICAM) -1 dan larut dalam E-selectin (sE-selectin) telah diuji oleh enzim-linked immunosorbent assay Kit (R & DSistem, Minneapolis, MN) pada awal dan pada akhirnya mo 6 suplementasi. Peradangan menghasilkan stres oksidatif dengan meningkatkan spesies oksigen reaktif (ROS), yang mengakibatkanoksidasi biologi molekul termasuk LDL. LDL teroksidasi mengaktifkan NF-jB dan up-mengatur gen target hilir, sitokin-sitokin inflamasi, CRP, molekul adhesi, diinduksi nitrogen monoksida sintase, cyclooxygenase 2, fibrinogen dan faktor jaringan. Sitokin dan molekul ini menarik lebih banyak sel-sel darah dan trombosit untuk koagulasi, yang memulai pengembangan aterosklerosis. Semakin banyak bukti menunjukkan bahwa CRP; sitokin-sitokin inflamasi seperti IL-6 dan MCP-1; adhesi molekul seperti VCAM, ICAM dan E-selectin; sPLA; dan lipid peroxidation produk sampingan berkaitan dengan pembangunan dan kemajuan atherosclerosis (2, 15-22). Pasien dengan aterosklerosisatau faktor-faktor risiko penyakit kardiovaskuler telah meningkatkan kadar sitokin inflamasi atau molekul. Oleh karena itu, kami memilih ini penanda untuk mengukur efek suplementasi zinkdalam studi kami. Studi budaya sel untuk mendukung bukti bahwa seng mungkin memiliki atheroprotectivefungsi, kami menggunakan manusia aorta sel-sel endotel (HAECs), garis sel leukemia manusia promyelocytic HL-60, yang membedakan ke monosit setelah stimulasi, dan cellline monocyticleukemia manusia THP-1 untuk mengukur oxidativestress spidol, sitokin-sitokin inflamasi, A20, PPAR-a, dan NF-jB aktivasikondisi kekurangan Seng dan seng-cukup. Seng-kekurangan sedang disiapkan dengan menghapus seng dari janin sapi serum (FBS) digunakan dengan budaya media seperti yang dijelaskan sebelumnya (23). Kamidikembangkan Seng-kekurangan media untuk mensimulasikan defisiensi zinc di vivo di manusia sehingga perbedaan antara sel-sel yang kekurangan Seng dan seng-cukup dapat dikelompokkan dalam sel berbudaya(23). untuk setiap cellline, kami dipantau kekurangan developmentof secara harian, seperti pertumbuhan sel dan/atau konten seluler seng, dan mendirikan optimal jumlah hari yang diperlukan untuk budayaSeng-kekurangan media untuk memperoleh Seng-kekurangan sel-sel yang layak. Zincdeficient (1lmol Zn/L) dan cukup seng (15lmol Zn/L, kondisi fisiologis) media berbeda hanya dalam kandungan zink mereka. HL-60 (CCL-240; Koleksi kultur jenis Amerika, Manassas, VA) sel-sel yang dipelihara dalam 10% FBS normal (tanpaChelation) - RPMI - 1640 media, seperti yang dijelaskan sebelumnya (23). THP-1 (TIB-202; Sel-sel koleksi jenis budaya Amerika) tetap dipertahankan dalam 10% normal FBS (tanpa chelation) - RPMI - 1640 menengah dilengkapi dengan 10 mmol/L HEPES di 37 C. HAECs (Cascade biologi, Portland, OR) tetap dipertahankan dalam 2% FBS normal (tanpa chelation)-menengah 200 dilengkapi dengan 10lg heparin/mL, 10 ng manusia faktor pertumbuhan epidermal / mL, faktor pertumbuhan fibroblast dasar ng 3/mL, dan 1lg hidrokortison/mL (Cascade biologi) di 37 C.A jumlah 2•105 sel/mL dipisahkan menjadi 2 kelompok. Satu set sel dipindahkan ke medium Seng-kekurangan, dan set lainnya dipindahkan ke medium seng-cukup. Sel-sel dalam media baik kekurangan seng atau seng-cukup yang diinkubasi10 d (HL-60 sel), 8 d (THP-1 sel) dan 6 d (HAECs) untuk mengembangkan kondisi kekurangan Seng dan seng-cukup. Kelangsungan hidup sel-sel yang diinkubasi sedang kekurangan seng atau zincsufficient adalah 83-86% untuk HAECs dan 89-94% untuk sel HL-60 dan THP-1. Ada tidak ada perbedaan yang signifikan antara kekurangan Seng dan seng-cukup sel (P.0.05). Setelah 24 h stimulasi dengan teroksidasi LDL (oxLDL, 50lg/mL; Teknologi biomedis, Stoughton, MA), kekurangan Seng dan seng-cukup sel dipanen untuk analisis blot Barat atau NF-jB aktivasi oleh electrophoretic mobilitas pergeseran assay (aku sakit) dan wartawan-gen luciferase tes. Media dikumpulkan untuk generasi sitokin inflamasi dan penilaian lipid peroxidation produk sampingan seperti yang dijelaskan. Rincian

Hasil (Bahasa Indonesia) 2:

SUBYEK DAN METODE
Penelitian subjek Manusia Protokol penelitian ini telah disetujui oleh Komite Investigasi Manusia (Wayne State University, Detroit, MI). Empat puluh sehat, mata pelajaran tua dari kedua jenis kelamin (berusia 56-83 y) dan
termasuk semua kelompok etnis dari St Patrick Senior Citizen Pusat (Detroit, MI) direkrut untuk berpartisipasi dalam, percobaan plasebo-terkontrol acak dari khasiat suplemen zinc pada
CRP, spidol stres oksidatif, sitokin inflamasi, dan molekul adhesi sel endotel tua dalam mata pelajaran. Sebuah tinjauan grafik lengkap setiap mata pelajaran lansia dilakukan oleh perawat penelitian
untuk menentukan kelayakan potensi nya untuk penelitian. Kriteria eksklusi dijelaskan sebelumnya (7). Kami dikecualikan orang-orang yang melengkapi diri seng, noncompetent, atau yang tidak mengerti dan tidak bisa menandatangani informed consent. Semua mata pelajaran tua kami yang bergerak tanpa jenis bantuan lainnya. Subyek penelitian manusia dilakukan dari September 2004 sampai Desember 2006.
pelajaran Lansia secara acak ditugaskan untuk kelompok seng atau plasebo berpasangan. Secara singkat, subyek ditugaskan untuk seng atau plasebo kelompok berpasangan dengan pilihan membutakan teknisi dari 1 dari 2 botol identik dicap sebagai obat studi (yaitu, tidak dicap sebagai seng atau plasebo): satu botol berisi pil seng, dan botol lainnya pil plasebo yang terkandung. Urutan tugas (yaitu, seng atau plasebo) dalam pasangan adalah acak, dan orang-orang peduli untuk mata pelajaran yang buta untuk tugas. Seng suplemen
kelompok menerima 45 mg zinc untuk 6 mo. Satu kapsul seng glukonat (15 mg elemental zinc) / d diambil 1 jam sebelum sarapan, dan 2 kapsul diambil sebelum tidur (2 jam setelah makan malam atau makan terakhir). Kelompok plasebo menerima kapsul plasebo dengan cara yang sama sebagai kelompok seng suplementasi. Kedua seng dan plasebo kapsul yang disediakan oleh Labcatal Laboratories (Paris, Perancis). Recommended Dietary Allowance untuk seng (asupan 15 mg seng / d untuk pria dan 12 mg seng / d wanita) didirikan
pada tahun 1974 untuk pertama kalinya. Asupan harian .50 mg seng / d selama 12 minggu dapat menyebabkan kekurangan tembaga (11, 12). Kami menggunakan 45 mg seng / d sebagai suplementasi pada orang tua untuk 1 y, dan pada konsentrasi ini, status tembaga tetap normal. Ini dosis seng efektif dalam memperbaiki disfungsi kekebalan tubuh (7).
Juga, spidol stres oksidatif dan generasi sitokin inflamasi yang menurun pada tingkat suplementasi (7). Satu-satunya efek samping dari suplemen zinc lisan dalam jumlah 0,50 mg seng / d adalah defisiensi tembaga, yang dapat dengan mudah diperbaiki dengan suplementasi 2 mg tembaga / d. Dalam sebuah studi
yang dilakukan oleh National Institute Eye (National Institutes of Health, Bethesda, MD), 80 mg seng / d sebagai oksida digunakan untuk mencegah kebutaan pada pasien dengan degenerasi makula terkait usia, dan untuk 10 y tidak ada efek samping yang substansial yang diamati; dalam penelitian ini, 2 mg tembaga / d juga dilengkapi untuk mencegah
defisiensi tembaga (13, 14). Dalam penelitian ini, darah diambil dari masing-masing subjek lansia
sebelum dan sesudah 6 bulan suplementasi untuk mengevaluasi konsentrasi plasma zinc, CRP, spidol stres oksidatif, sitokin inflamasi, dan molekul adhesi sel endotel. Plasma seng diuji dengan flameless spektrofotometri serapan atom (7). Plasma peroksidasi lipid produk sampingan,
malondialdehid dan hydroxyalkenals (MDA + HAE), diukur dengan menggunakan thiobarbituric asam lemak uji peroksidasi kit (Oxford Biokimia Penelitian, Oxford, MI); highsensitivity plasma CRP (hsCRP) dinilai dengan enzim-linked immunosorbent assay (Alpco Diagnostics, Windham, NH); plasma
kekuatan antioksidan diukur oleh ABEL antioksidan test kit (Ksatria Ilmiah, Plymouth, Inggris Raya); plasma IL-6, MCP-1, fosfolipase A2 sekretori (SPLA), larut sel vaskular
molekul adhesi (sVCAM) -1, larut intercellular adhesion molecule (sICAM) -1, dan larut E-selektin (sE-selektin) yang diuji oleh enzyme-linked immunosorbent assay kit (R & D
Systems, Minneapolis, MN) pada awal dan pada akhir 6 bulan suplementasi. Peradangan menghasilkan stres oksidatif dengan meningkatkan spesies oksigen reaktif (ROS), yang menghasilkan
oksidasi molekul biologis termasuk LDL. LDL teroksidasi mengaktifkan NF-JB dan up-mengatur gen target hilir, seperti sitokin inflamasi, CRP, molekul adhesi, diinduksi nitrat oksida sintase, siklooksigenase 2, fibrinogen, dan faktor jaringan. Sitokin ini dan molekul menarik lebih banyak sel darah dan trombosit untuk koagulasi, yang memulai perkembangan aterosklerosis. Semakin banyak bukti menunjukkan bahwa CRP; sitokin inflamasi seperti IL-6 dan MCP-1; molekul adhesi seperti VCAM, ICAM, dan E-selektin; SPLA; dan produk sampingan peroksidasi lipid yang terkait dengan pengembangan dan perkembangan aterosklerosis (2, 15-22). Pasien dengan aterosklerosis
atau risiko penyakit kardiovaskular faktor telah meningkatkan konsentrasi sitokin inflamasi atau molekul. Oleh karena itu, kami memilih tanda tersebut untuk mengukur efek dari suplementasi zinc
dalam penelitian kami. Penelitian kultur sel Untuk mendukung bukti bahwa seng dapat memiliki atheroprotective
fungsi, kami menggunakan sel manusia aorta endotel (HAECs), garis sel manusia leukemia promyelocytic HL-60, yang berdiferensiasi menjadi monosit setelah stimulasi, dan monocyticleukemia cellline manusia THP-1 untuk mengukur penanda oxidativestress, sitokin inflamasi, A20, PPAR-a, dan aktivasi NF-JB
dalam kondisi kekurangan zinc dan seng-cukup. Menengah Zinc-kekurangan disiapkan dengan menghapus seng dari serum janin sapi (FBS) yang digunakan dengan media kultur seperti yang dijelaskan sebelumnya (23). Kami
mengembangkan media seng-kekurangan untuk mensimulasikan defisiensi zinc vivo pada manusia sehingga perbedaan antara sel-sel seng-kekurangan dan seng-cukup dapat dicirikan dalam sel kultur
(23). Untuk setiap cellline, kami memantau kekurangan developmentof setiap hari, seperti pertumbuhan sel dan / atau kandungan seng selular, dan mendirikan jumlah optimum hari yang dibutuhkan untuk budidaya di
media seng-kekurangan untuk mendapatkan sel-sel yang layak seng-kekurangan. Zincdeficient (1lmol Zn / L) dan seng-cukup (15lmol Zn / L, kondisi fisiologis) Media hanya berbeda dalam kandungan seng mereka. HL-60 (CCL-240, American Type Culture Collection, Manassas, VA) sel dipertahankan dalam 10% yang normal FBS (tanpa
khelasi) media -RPMI-1640, seperti yang dijelaskan sebelumnya (23). THP-1 (TIB-202, American Type Culture Collection) sel dipertahankan dalam 10% FBS normal (tanpa khelasi) media -RPMI-1640 dilengkapi dengan 10 mmol / L HEPES pada 37 C. HAECs (Cascade Biologis, Portland, OR) yang diselenggarakan dalam 2% FBS normal (tanpa khelasi) -medium 200 dilengkapi dengan 10lg heparin / mL, 10 ng faktor pertumbuhan epidermal manusia / mL, 3 ng faktor pertumbuhan fibroblast dasar / mL, dan 1LG hydrocortisone / mL (Cascade Biologis) pada 37 CA total 2 • 105 sel / mL dipisahkan menjadi 2 kelompok. Satu set sel dipindahkan ke media seng-kekurangan, dan set lainnya dipindahkan ke media seng-cukup. Sel-sel baik media seng-kekurangan atau seng-cukup diinkubasi
selama 10 d (HL-60 sel), 8 d (THP-1 sel), dan 6 d (HAECs) untuk mengembangkan kondisi kekurangan zinc dan seng-cukup. Kelangsungan hidup sel-sel diinkubasi baik media seng-kekurangan atau zincsufficient adalah 83-86% untuk HAECs dan 89-94% untuk HL-60 dan THP-1 sel. Tidak ada perbedaan yang signifikan antara seng-kekurangan dan sel seng-cukup (P.0.05). Setelah 24 jam stimulasi dengan LDL teroksidasi (oxLDL, 50lg / mL; Biomedis Technologies, Stoughton, MA), sel-sel seng-kekurangan dan seng-cukup dipanen untuk analisis Western blot atau NF-JB aktivasi dengan alat tes pergeseran mobilitas elektroforesis (EMSA) dan tes luciferase reporter-gen. Media dikumpulkan untuk penilaian produk sampingan peroksidasi lipid dan generasi sitokin inflamasi seperti yang dijelaskan. Rincian