Peptida pemisahan. Peptida Campuran

Peptida pemisahan. Peptida Campuran yang acidified oleh tambahan dari 10% trifluoroacetic Asam () TFA ke final konsentrasi tahun 0.4%, centrifuged dan desalted menggunakan C18 SepPak Kartridge Perairan (). Peptida Purified yang dipisahkan menggunakan hydrophilic interaksi HILIC Kromatografi () ke 20 fractions menggunakan 4.6 mm x 250 mm TSKgel Amide-80 partikel pukul 5 kolom (Tosoh Biosciences) dengan gradien dari 50 menit 5%-28% [] di H.sub.2 ya acetonitrile (0.1%) TFA.

LC-MS/MS analisis. Peptida Dried yang dibubarkan tahun 5% acetonitrile dan 4% formic asam, dan l [2] mikro dari solusi itu dimuat ke dalam kolom microcapillary penuh dengan C18 bercucuran (Magic C18AQ [] mikro, 5 m, Ångström [200], [125] mikro m x 16 cm) menggunakan Famos autosampler (LC Packings). Peptida yang dipisahkan oleh reversed-phase Kromatografi menggunakan Agilent 1100 biner memompa dengan gradien dari 70 menit 5-30% acetonitrile di formic Asam (0.125%) dan terdeteksi di mobil hibrid dual-cell empat lurus ion trap-orbitrap spektrometri massa (LTQ Orbitrap Velos, ThermoFisher) menggunakan metode data-dependent Top20 (38). Untuk setiap bersepeda, seorang Gas-Spektrometri Massa memindai dalam 3 x 106 Orbitrap di kontrol perolehan otomatis () AGC target diikuti oleh hingga 20 MS/MS memindai dalam LTQ yang paling kuat untuk ion. Terpilih ion dikeluarkan dari analisis lebih lanjut untuk s 30. Ion dengan ongkos +1 juga tidak ditetapkan atau ditolak. ion akumulasi maksimum adalah 1,000 kali massa ms untuk setiap penuh Gas-Spektrometri memindai dan 150 ms untuk MS/MS pemindaian.

Hasil (Bahasa Indonesia) 1:

Peptida pemisahan. Peptida Campuran yang Diasamkan oleh tambahan dari 10% trifluoroacetic Asam () TFA ke akhir konsentrasi tahun 0,4%, menggunakan disentrifugasi dan desalted (C18 SepPak Kartridge Perairan). Peptida dimurnikan yang dipisahkan menggunakan hidrofil interaksi HILIC Kromatografi () ke 20 pecahan menggunakan 4.6 x 250 mm TSKgel Amida-80 partikel pukul 5 kolom (Tosoh Biosciences) dengan gradien dari 50 menit 5-28% [] di H.sub.2 ya asetonitril (0,1%) TFA.Analisis LC-MS/MS. Peptida kering yang dibubarkan tahun asetonitril 5% dan 4% formic asam, l [2] dan mikro dari solusi itu dimuat ke dalam kolom microcapillary dengan penuh C18 bercucuran (Magic C18AQ [] mikro, 5 m, Ångström [200], [125] mikro m x 16 cm) menggunakan Famos autosampler (LC Kemasan). Peptida yang dipisahkan oleh dibalik fase Kromatografi menggunakan Agilent 1100 biner memompa dengan gradien dari 70 menit 5-30% asetonitril di formic Asam (0,125%) dan terdeteksi di mobil hibrid dual-sel empat lurus perangkap ion-orbitrap spektrometri massa (LTQ Orbitrap Velos, ThermoFisher) menggunakan metode bergantung pada data Top20 (38). Untuk setiap bersepeda, diangkat Gas-Spektrometri Massa memindai dalam 3 x 106 Orbitrap di kontrol perolehan otomatis () AGC target diikuti oleh hingga 20 MS MS memindai dalam LTQ yang paling kuat untuk ion. Terpilih ion dikeluarkan dari analisis lebih lanjut untuk s 30. Ion dengan ongkos + 1 juga tidak ditetapkan atau ditolak. Ion akumulasi maksimum adalah 1.000 kali massa ms untuk setiap penuh Gas-Spektrometri memindai dan 150 ms untuk MS MS pemindaian.

Hasil (Bahasa Indonesia) 2:

Peptida pemisahan. Peptida Campuran Yang diasamkan Oleh Tambahan Dari 10% trifluoroasetat Asam () TFA Ke akhir konsentrasi Tahun 0,4%, disentrifugasi Dan dihilangkan garamnya using C18 SepPak Kartridge Perairan (). Peptida dimurnikan Yang dipisahkan using hidrofilik Interaksi HILIC Kromatografi () KE 20 fraksi using 4,6 mm x 250 mm TSKgel Amida-80 partikel Pukul 5 Kolom (Tosoh Biosciences) DENGAN gradien Dari 50 Menit 5% -28% [] di H2 ya asetonitril (0,1%) TFA.

LC-MS / MS analisis. Peptida Kering Yang dibubarkan Tahun 5% asetonitril dan 4% asam formiat, Dan L [2] Solusi mikro Dari ITU dimuat Ke hearts Kolom microcapillary Penuh DENGAN C18 bercucuran (Magic C18AQ [] mikro, 5 m, angstrom [200], [125] mikro mx 16 cm) using Famos autosampler (LC kemasan). Peptida Yang dipisahkan Oleh fase terbalik Kromatografi using Agilent 1100 biner memompa DENGAN gradien Dari 70 Menit 5-30% asetonitril di Asam (0,125%) formiat Dan terdeteksi di mobil hibrid empat dalam dual-sel lurus perangkap ion-Orbitrap spektrometri massa (LTQ Orbitrap Velos , ThermoFisher) using Metode Data-dependent Top20 (38). Untuk review SETIAP Bersepeda, Seorang Gas-Spektrometri Massa memindai hearts 3 x 106 Orbitrap di Kontrol Yang Dimiliki otomatis () AGC Target diikuti Oleh Hingga 20 MS / MS memindai hearts LTQ Yang memucat KUAT ion untuk review. Terpilih ion dikeluarkan Dari analisis LEBIH lanjut untuk review s 30. Ion DENGAN ongkos 1 also TIDAK ditetapkan ATAU ditolak. ion akumulasi Maksimum Adalah 1.000 ms Kali massa untuk review SETIAP Penuh Gas-Spektrometri memindai Dan 150 ms untuk review MS / MS pemindaian.