Ekspresi dan Pemurnian rekombinan Bovine Enteropeptidase- Untuk memfasilitasi produksi enteropeptidase rekombinan, domain membran-spanning dekat amino
terminus digantikan dengan peptida sinyal protrombin manusia, yang memungkinkan sekresi ke dalam medium AC. Tag Ilis6 termasuk setelah tempat pembelahan sinyal peptidase, memungkinkan pemurnian dengan kromatografi pada resin asam Ni21-nitrilotriacetic. Dua bentuk enteropeptidase rekombinan dibangun (Gambar. 1) untuk menguji kontribusi dari rantai berat untuk pengakuan makromolekul. HL-BEK terpotong sebelum domain reseptor-seperti kepadatan rendah lipoprotein pertama dan berisi sisa rantai berat dan rantai ringan. L-BEK terpotong setelah residu sistein terakhir
domain reseptor-seperti makrofag pemulung dan berisi terutama rantai cahaya melekat pada segmen karboksil-terminal pendek dari rantai berat. Ini mempertahankan ikatan disulfida diprediksi menghubungkan Cys-788 dari rantai berat untuk Cys-912 rantai cahaya, berdasarkan organisasi chymotrypsinogen dan protease serin homolog lain yang memiliki keterkaitan disulfida antara domain protease dan aktivasi peptida (Gambar. 1). Massa dihitung dari komposisi asam amino 101 kDa untuk pro-HL-BEK dan 36 kDa untuk pro-L-BEK.
Sedang diterjemahkan, harap tunggu..
