Czech J. Food Sci. Vol. 27, 2009, S

Czech J. Food Sci. Vol. 27, 2009, Special Issue 2: S2-75–S2-81




Detection of Transgenic Papaya Lines: Extraction Protocol Optimisation and Verification of DNA Quality by PCR Assay

Jaroslava Ovesná and Jan Hodek


Department of Molecular Biology, Crop Research Institute, Prague-Ruzyně, Czech Republic

Abstract: Food matrices are controlled for the presence of authorised and unauthorised GMOs (Genetically Modified Organisms). Transgenic papaya was developed and approved for the market in the USA. However, authorisation in EC have not been accomplished. Recently, unauthorised GM papaya was catch on EC market. Therefore it is necessary to dispose by an assay revealing genetically modified fruits. High quality DNA is required for the assay. We tested and optimised CTAB, Wizard and spin column based procedure for DNA extraction. We found that CTAB based proto-col allows isolation of amplifiable DNA from fresh fruit flesh and stones, whereas spin columns alowed isolation of amplifiable DNA from candied fruits. Modified protocol is described. No transgenic fresh fruit or candied fruit from the market was detected.

Hasil (Bahasa Indonesia) 1:

Ceko J. makanan Sci. Vol. 27, 2009, khusus edisi 2: S2-75-S2-81Deteksi transgenik pepaya baris: ekstraksi protokol pengoptimalan dan verifikasi DNA kualitas oleh PCR AssayJaroslava Ovesná dan Jan HodekDepartemen biologi molekuler, tanaman Research Institute, Praha-Ruzyně, Republik CekoAbstrak: Matriks makanan dikendalikan untuk kehadiran resmi dan tidak sah GMO (Genetically Modified organisme). Pepaya transgenik dikembangkan dan disetujui untuk pasar di Amerika Serikat. Namun, otorisasi di EC telah tidak diselesaikan. Baru-baru ini, tidak sah GM pepaya menangkap EC pasar. Oleh karena itu sangatlah perlu untuk membuang dengan sebuah alat tes yang mengungkapkan buah-buahan yang dimodifikasi secara genetik. DNA berkualitas tinggi diperlukan untuk alat tes. Kami menguji dan dioptimalkan CTAB, Wizard dan spin kolom berdasarkan prosedur untuk isolasi DNA. Kami menemukan bahwa CTAB berbasis proto-col memungkinkan isolasi amplifiable DNA dari daging buah segar dan batu, sedangkan berputar kolom alowed isolasi amplifiable DNA dari manisan buah-buahan. Protokol dimodifikasi digambarkan. Tidak ada transgenik buah segar atau manisan buah-buahan dari pasar terdeteksi.